真武汤对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响*
2011-02-06陈国庆姚淮芳
陈国庆 姚淮芳
1安徽中医学院(安徽合肥230038)
2安徽省中医院(安徽合肥230031)
慢性心力衰竭(CHF)的基本病因是原发性心肌损害以及前后负荷增加,与交感神经兴奋,肾素-血管紧张素-醛固酮系统激活密切相关。近年来研究证明,心肌细胞凋亡是CHF过程中心肌细胞丧失的重要机制,心肌细胞凋亡亢进参与了CHF的基本病理生理进程[1-2]。心肌细胞凋亡是心肌肥大向心衰转化的关键因素。因此,抑制心肌细胞的凋亡对心衰的治疗十分重要。选择有效的药物进行早期干预,打断心力衰竭的恶性循环,就可延缓心力衰竭的发生发展。
1 材料与方法
1.1 动物及药物 健康雄性 wistar大鼠 60只,体质量200~240g,购于安徽全椒动物公司。真武汤组成:熟附片10g,茯苓15g,白术10g,生姜15g,白芍15g。按比例配伍组成,加入500mL水,煎30min,过滤浓缩至1.0g/mL,由安徽省中医院制剂中心提供。注射用青霉素,由华北制药股份有限公司提供,批号:X1002321。依那普利片,由江苏扬子药业公司提供,批号H3202731。
1.2 主要试剂 Trizol试剂、逆转录试剂盒,PCR试剂和Taq DNA聚合酶,DNA Marker(美国Fermentas公司)、琼脂糖凝胶(OXOID,英国),溴化己锭(10mg/mL,Sigma 公司,美国),引物用Primer Premier 5.0软件设计,并由上海生工技术有限公司合成。bcl-2、bax、β-actin兔抗人单克隆抗体:购于博士德生物工程有限公司。羊抗兔IgG(辣根过氧化物酶标记),购于联科生物技术有限公司。EZ-ECL增强型化学发光显色试剂盒,购于Biological Industries公司。PVDF膜,购于Millipore公司。丽春红,购于碧云天生物技术研究所。考马斯亮蓝G-250,购于上海化学试剂厂。考马斯亮蓝G-250蛋白测定试剂盒,购于南京建成生物工程研究。抗体稀释液,购于博士德生物工程有限公司。……
