李 娜 张 雷 安鹏丽 高云欢 张 丽 王家鑫

(河北农业大学动物科技学院免疫学实验室,保定071000)

口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(FMD virus,FMDV)感染偶蹄动物所引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,目前尚无理想的防治措施[1,2]。业已证明,细胞免疫应答在清除病毒感染过程中发挥重要作用,并且动物产生抗FMDV抗体的过程也依赖于细胞免疫应答[3],但目前对机体抗FMDV细胞免疫应答的机制仍不甚清楚。

FMDV是由 VP1、VP2、VP3和 VP4四种衣壳蛋白包裹单股正链RNA组成的正二十面体结构。其中VP1、VP2和VP3位于衣壳的表面,VP4位于衣壳的内部[1,4]。一般认为,该病毒的主要抗原位点在VP1的G-H环上,其特定氨基酸序列构成能够刺激免疫应答的T、B细胞抗原表位,在其顶部形成一个高度保守的Arg-G ly-Asp(RG D)序列,是 FMDV与宿主细胞受体相结合的位点,并且VP1蛋白质可诱导产生中和抗体[1,5]。因此,VP1成为各类新型疫苗研究的候选抗原之一。无论是原核表达系统,还是真核表达系统所表达的VP1均可刺激动物产生体液免疫应答,但目前尚不清楚VP1刺激细胞免疫应答的机制[6-8]。

树突状细胞(Dendritic cell,DC)是启动细胞免疫应答的专职抗原提呈细胞,可通过多种抗原提呈途径启动细胞免疫应答[9]。DC组成性表达MHCⅡ类分子,可将外源性抗原提呈给CD4+T细胞,使之分化为Th1、Th2、Th17和T reg细胞等。其中Th1细胞在清除细胞内病毒感染过程中发挥至关重要的作用[10]。

本研究用原核表达载体pET32a表达口蹄疫病毒VP1蛋白质,将其负载小鼠骨髓源树突状细胞(Bone morrow-derived dendritic cell,BMDC),再与小鼠颈浅淋巴结T细胞共培养,通过检测共培养物上清液中 IFN-γ的含量,探讨负载VP1蛋白质的BMDC对T细胞的活化效应。……