杨 阳, 鲁 军, 孙冰洁, 王 丹, 尹晓燕, 任迪峰＊

(1.北京林业大学生物科学与技术学院,北京 100083;2.中国食品发酵工业研究院,北京 100027)

白藜芦醇对酪氨酸酶体外抑制活性的动力学研究

杨 阳1, 鲁 军2, 孙冰洁1, 王 丹1, 尹晓燕1, 任迪峰＊1

(1.北京林业大学生物科学与技术学院,北京 100083;2.中国食品发酵工业研究院,北京 100027)

在30℃,p H 6.8的Na2HPO4-NaH2PO4的缓冲体系中,采用酶促动力学方法,研究了白藜芦醇对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的抑制作用。结果表明,白藜芦醇对酪氨酸酶、单酚酶和二酚酶均有抑制作用,对单酚酶抑制活性的IC50值(抑制率达到50%时的白藜芦醇质量浓度)约为5.1 mg/m L,对二酚酶抑制活性的IC50值约为5.6 mg/m L。此外,白藜芦醇可延长单酚酶的迟滞效应,8 mg/mL的白藜芦醇能使迟滞时间从22 s延长至62 s,而对二酚酶则无此迟滞作用。Lineweaver-Burk图分析表明,白藜芦醇对酪氨酸酶的抑制作用为混合型抑制,对游离酶的抑制常数(KI)和对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)分别为3.4 mg/m L和35.98 mg/m L。

白藜芦醇;酪氨酸酶;抑制活性;酶促动力学

酪氨酸酶(Tyrosinase)是由二价铜离子与酶蛋白结合的金属酶,是生物体合成黑色素的关键酶[1,2],可催化含酚基化合物(如酪氨酸、酚类化合物等)氧化成多巴醌,经一系列中间反应后形成黑色素,而黑色素的合成、分布与哺乳动物皮肤、毛发的色素沉积直接相关[3,4],与果蔬褐变也有着有重要的关系[5]。因此,通过筛选合成酪氨酸酶抑制剂,抑制酪氨酸酶的活性来控制黑色素的合成,已成为防止果蔬褐变、色斑治疗及美白化妆品研制的一种重要途径。……