许永志，谢志雄，朱小东

(解放军第175医院 厦门大学附属东南医院检验科，福建 漳州 363000)

Coulter LH750全自动血细胞分析仪的性能评价

许永志，谢志雄，朱小东

(解放军第175医院 厦门大学附属东南医院检验科，福建 漳州 363000)

Coulter LH750；全自动血液分析仪；性能评价

Coulter LH750是美国贝克曼库尔特公司推出的全自动五分类血细胞分析仪，它可对血液的多种细胞组分(包括白细胞的五种组分)进行定量分析[1]。其中红细胞和血小板采用电阻抗检测，血红蛋白采用HiCN法检测，白细胞则采用VCS结合细胞化学染色技术，经专用的WBC/DIFF检测通道(流动室)进行测定。我们以ISCH[2]和NCCLS[3-5]制定的评价方案为标准，对该仪器的全血细胞计数(complete blood count，CBC)和白细胞分类(differential count，DC)进行性能评价[6]。现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器 美国Beckman-Coulter公司。

1.1.2 试剂 美国Beckman-Coulter公司原装配套试剂，包括稀释液、分类试剂包、溶血剂及清洗液。

1.1.3 质控品 美国Beckman-Coulter公司原装配套5C质控品。

1.1.4 Olympus显微镜由日本奥林巴斯光学工业株式会社生产。

1.1.5 其他手工测定血液细胞方法所用试剂，均为市售AR级试剂。

1.2 标本采集 采自健康体检者，部分为本院住院病人标本，静脉血(以EDTA-K3抗凝)。所有检测均于采样后2h内完成。

1.3 方法

1.3.1 全血细胞计数 CBC、DC、PLT、Hb自动分析按照仪器操作说明书进行，在室内质控在控的情况下进行测定。

1.3.2 主要性能评价试验 按照ICSH、NCCLS和CLIA’88提供的评价标准进行，包括精密度、线性、携带污染率、准确度、DC与人工分类结果比较的评估。

1.3.3 参考方法 白细胞手工分类由3位有经验的工作人员采用双盲法对同一标本分类600个WBC，结果取平均值。

1.3.4 所有结果均经Microsoft Excel 2003软件进行数据分析。

2 结果

2.1 精密度 测定结果表明：Coulter LH750全自动血液分析仪对血液各细胞组分的测定具有很高的精密度，测定所得的变异系数(CV%)均低于预期要求。详见表1、表2。

表1 Coulter LH750批内精密度测定结果

2.2 线性 取一份高值血细胞抗凝血样本离心除去部分血浆，WBC、RBC、HGB、 和 PLT 值分别为 195.5×109/L、9.585×1012/L、297.5g/L和3299×109/L，以此样本为100%。用稀释液对血样按 90%、80%、40%、20%、10%、2.50%、0%进行稀释，然后从低到高以LH750测定各稀释样本，并经计算所得与各稀释度预期值项比较。由于血小板的浓度过高，因此对于第二低值进行再稀释，然后测定各稀释度的样本，测定结果与各稀释度的预示值作线性回归分析。详见表3。

2.3 携带污染率 取正常人全血，约4ml，混匀后分装两管；取三个干净的试管，每管中加入大约2ml的稀释液。将五个试管按前两管为全血，后三管为稀释液装入同一试管架；将试管架放入样本装载区，仪器将自动进行检测。测定结束后仪器将自动计算出携带污染率，携带污染率(CV%)=[(D1-D3)/(B2-D3)]×100，D1表示第一管稀释液结果，D3表示第三管稀释液结果，B2表示第二管全血结果，结果见表4。

2.5 准确度 通过2010年度第一次福建省临检中心室间质评回报结果，所有项目数值均在允许范围内，且偏倚均小于我科质量目标预期值(＜1/2 CLIA’88)详见表5。

2.6 与手工分类结果比较 取78份住院患者的抗凝血在LH750仪器上测定，每份样本重复测2次取均值。同时每份血推3张符合质控要求的血片，染色后由3位有经验的技师在体尾交界处进行白细胞分类，分为中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞五部分，每张血片油镜分类计数200个白细胞，共计800个白细胞取均值，再与LH750仪器的白细胞分类值进行比较。以LH750仪器白细胞分类值为X轴、显微镜白细胞分类值为Y轴，其中45例非白血病标本两种方法的对比结果详见表6。

表2 Coulter LH750批间精密度测定结果

表3 不同稀释度预测值与实测值的相关性

表4 各参数携带污染率测定值及结果

表5 2010年度第一次福建省临检中心血细胞分析室间质评结果

结果表明 LH750对N、L、E的分类结果较好，M次之，B的分类效果则尚可。

2.7 对幼稚细胞筛选的评估 对于33例有幼稚细胞的白血病标本，仪器均有一个和/或多个报警提示及散点图显示异常。对这些33份标本进行手工镜检幼稚细胞，并与LH750进行比较，相见表7。

表6 LH750与显微镜人工分类结果比较(n=45)

表7 LH750与手工镜检幼稚细胞比较

据此得出LH750对幼稚细胞筛选的有关预示值为：检出灵敏度93.3%；检出特异性88.9%；阳性预示值87.5%；阴性预示值94.1%。

3 讨论

通过对LH750全自动血细胞分析仪的性能评价发现，该仪器对全血细胞计数线性良好，携带污染率非常低，CBC各参数精密度高，各参数指标均符合本科室制定的质量目标标准。

比较DC与显微镜镜检结果，我们发现其中M和B的分类结果稍有偏差，分析其原因，可能与全血细胞中这类细胞的数量少，在制片的同时于血片上分布不均从而造成手工分类的偏差；也有可能进行镜检分类操作者分析技术不够完善等。同时，对幼稚细胞的筛选结果表明，LH750对异常细胞的检出能力很强，有利于大量常规标本的过筛，而对分类提示异常的标本，仍需手工镜检分类。但由于本次统计白细胞分类计数标本数量较少，仪器白细胞分类报警的真阳性率、假阳性率等指标有待于今后增加白细胞分类的标本数量再进一步分析。

总之，通过对Coulter LH750血细胞分析仪的性能评价，结果显示该仪器测定速度快、检测参数多、精密度、准确度高，与已知性能的血细胞分析仪相关性好，是一种性能优良的全血细胞分析仪，能够满足临床血液常规与大批量常规标本的检验需要。

[1]Coulter LH750 Operator Manuals.Beckman-Coulter Co,Ltd,USA.

[2]International Council for Standardization in Hematology.Guidelines for the evaluation of blood cell analyzer including those used for differential leukocyte and reticulocyte counting and cell i/larker application.Prepared by the ICSH expert panel on cytometry[J].Clin LabHemat,1994,16:157.

[3]National Committee for Clinical Laboratory Standards.Leukocyte Differential Counting NCCLS Approved Standard H20-A2 [S].Villanova PA,1992.

[4]National Committee for Clinical Laboratory Standards．Procedures and devices for the coUecfion of diagnostic blood spedmens by skin puncture；Approved standard fourth edition[S].NCC1S document H4 A4(ISBN 1 56238-382-5),1999.

[5]余立江,等.NCCLS文件EP5T推荐的评价仪器精密度性能方法的应用[J].中华医学检验杂志,1992(3):172-174.

[6]丛玉隆,王淑娟.今日临床检验医学[M].北京:中国科学技术出版社,1997.

R446.11+1

B

1674-1129(2010)04-0399-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2010.04.036

南京军区医药卫生科研基金课题（08MA076）