张晓川，李志浩

(郧阳医学院附属东风医院药剂部，湖北 十堰 442008)

为保护患者免受药物中残留有机溶剂的伤害，须对药品生产过程中引入的有机溶剂残留量进行检测[1]。醋酸氯地孕酮为口服强效孕激素，并无雌激素和雄激素活性，其抗排卵作用为炔诺酮的18.4倍，与长效雌激素炔雌醚配伍组成复方炔雌醚片，可作为长效口服避孕药。该药物在合成过程中使用了乙醇、氯仿和N，N-二甲基甲酰胺(DMF)等有机溶剂，这些有机溶剂残留量超标将影响药品质量和用药安全。目前，对残留溶剂的测定多采用气相色谱法[2]。笔者采用毛细管色谱柱、顶空进样、程序升温法同时测定醋酸氯地孕酮中3种有机溶剂残留量，并进行了方法学考察，报道如下。

1 仪器与试药

Agilent 6890N型气相色谱仪(氢离子火焰检测器);AEU-210型电子天平(d=0.1 mg，日本岛津)。醋酸氯地孕酮精制品(武汉三晶化工有限公司，批号为 080703，080705，080710);乙醇、DMF、氯仿为分析纯，水为双蒸水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:HP-5毛细管柱(30 m ×0.32 mm，0.25 μm);分流比:10∶1;柱温:60℃(5 min，30℃ /min)→200℃;瓶温:80℃，平衡时间为30 min;载气:氮气;流速:1.0 mL/min;进样口温度:210℃;检测器温度:250℃;氢气流速:45.0 mL/min;空气流速:400.0 mL/min;尾吹:25.0 mL/min;进样量:1 μL。

2.2 溶液制备

分别取乙醇、氯仿和DMF适量，精密称定，用水稀释成质量浓度分别为2.682，0.047，0.763 g/L的混合溶液A[质量浓度设计参照2005年版《中国药典(二部)》规定的有机溶剂残留限度及预试验结果]。精密量取5 mL混合溶液A，置100 mL量瓶中，用水定容，摇匀，得混合溶液B。取醋酸氯地孕酮原料药约0.2 g，精密称定，置顶空进样瓶中，精密加水2 mL使溶解，加盖，密封，作为供试品溶液。

2.3 方法学考察

线性关系考察:分别精密量取1，3，5，8，10mL对照品混合溶液A，置25 mL量瓶中，加水至刻度，摇匀。分别精密量取2 mL，置顶空进样瓶中，密封，进样检测。以峰面积(A)对质量浓度(C)进行线性回归。乙醇、氯仿和DMF的回归方程分别为 A=873.82 C+3.741(r=0.999 9)，A=2 074.32C+0.408(r=0.999 1)，A=123.78C+1.054(r=0.999 7)，线性范围分别为 0.107 3～1.072 8 g/L，0.001 9～0.018 8 g/L，0.030 5～0.305 2 g/L。

最低检测限确定:将质量浓度最低的对照品溶液逐步稀释，按上述色谱条件取1 μL进样检测，按基线噪音的3倍(S/N≈3)计算。结果乙醇、氯仿及 DMF的最低检测限分别为1.082，1.275，16.84 μg/mL。

精密度试验:精密量取2 mL对照品混合溶液B，共6份，分别置顶空进样瓶中，密封，按以上色谱条件进样测定。再精密量取2 mL混合溶液B，共6份，分别置顶空进样瓶中，密封，按以上色谱条件连续3 d测定中间精密度。结果乙醇、氯仿及DMF日内精密度的RSD分别为2.4%，1.8%，2.2%(n=6);日间精密度的 RSD分别为 4.8%，3.9%，5.2%(n=6)。

加样回收试验:取已测定乙醇、氯仿、DMF含量的醋酸氯地孕酮约0.1 g，精密称定，共5份，分别置顶空进样瓶中，各精密加入2 mL混合对照品溶液B，按上述色谱条件测定。结果乙醇、氯仿及DMF的平均回收率分别为101.7%，92.8%，104.6%;RSD分别为2.3%，2.9%，1.8%(n=5)。

2.4 样品检测

取样品3批，照2.2项下方法制备供试品溶液，按2.1项下色谱条件测定有机溶剂残留量，记录色谱图(图1);按外标法以峰面积计算残留量，结果见表1。

3 讨论

采用顶空进样法可提高有机物检出的灵敏度和准确度，从而更加严格地控制药物中有机溶剂的残留量，提高药品质量。醋酸氯地孕酮在水中的溶解度较好，采用本法时水不影响待测溶剂的检测，故用水作溶剂。

图1 气相色谱图

表1 样品中有机溶剂残留量测定结果(%，n=3)

考虑到待测有机溶剂残留溶剂的沸点均小于80℃，故将顶空瓶加热温度选为80℃;在此条件下，对顶空瓶平衡时间进行筛选，发现平衡30 min后，峰面积基本不再改变，因此选择在80℃下平衡30 min。

药品中有机溶剂残留种类因生产工艺不同而异。文中各有机溶剂限度均参照了人用药品注册技术规范国际协调组织(ICH)[3]和2005年版《中国药典(二部)》[4]，氯仿和 DMF列为Ⅱ类有机溶剂，乙醇列为Ⅲ类有机溶剂，安全限度分别为0.006%，0.088%，0.5%。从3批样品测定结果来看，均符合2005年版《中国药典(二部)》的限度要求。

采用顶空毛细管气相法测定醋酸氯地孕酮中3种有机溶剂残留量，色谱分离良好，无干扰，精密度符合2005年版《中国药典(二部)》的规定，方法准确、可靠、快速、简便。

[1]王 卫.药品中有机溶剂残留量及其测定[J].天津药学，2001，13(3):26-27.

[2]王翰华，王向军，曾 苏，等.顶空毛细管气相法测定鸡肝散提取物中有机溶剂残留量[J].药物分析杂志，2008，28(2):267-269.

[3]李 眉，马玉楠.简介ICH关于药品中溶剂残留量的指导原则[J].中国药师，1998，1(3):119-120.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:化学工业出版社，2005:附录54.