卓佳，陈柏坤，黄慧燕，徐瑜，张洪勤

(温州医学院，浙江 温州 325035，1.生物学实验教学中心；2.附属第二医院)

白色念珠菌广泛分布于自然界，也是人体的一种条件致病菌，正常人体的皮肤、口腔、肠道、肛门、阴道等处均可分离出该菌。近年来，随着免疫抑制剂、介入性检查治疗手段的广泛应用，肿瘤化疗、放疗，器官移植，艾滋病和社会老龄化等因素引起的免疫功能低下人群比例增高，临床真菌感染呈上升趋势，尤其是近年来抗真菌感染的治疗或者预防性治疗，导致真菌感染菌株及耐药趋势发生变化[1]。本研究采用PCR分型方法，对临床分离的121株白色念珠菌进行基因分型，并对不同基因型白色念珠菌进行药物敏感性研究。

1 材料和方法

1.1 菌株来源 2006年7月至2008年3月间温州医学院附属第二医院临床分离的121株白色念珠菌。标本来源于痰、咽拭子、生殖道分泌物、尿液、血液、粪便、腹水、伤口分泌物等。质控菌株为白色念珠菌ATCC60193，购自卫生部临床检验中心。

1.2 仪器和试剂 法国科玛嘉显色培养基（CHRO Magar Candida）、API 20C AUX系统购自法国生物梅里埃公司；沙保弱琼脂培养基、玉米-吐温80培养基、含2%葡萄糖和0.5μg/mL美兰的M-H琼脂培养基、YEPD培养基(用于酵母原生质体融合)：酵母粉10 g，蛋白胨20 g，葡萄糖20 g，蒸馏水1000 mL，pH6.0（自制）；2%蜗牛酶；原生质缓冲液：1 mol/L山梨醇，0.02 mol/L柠檬酸，0.02 mol/L磷酸氢二钠，pH5.8；SE缓冲液：1 mol/L山梨醇，0.0625 mol/L EDTA，pH 8.0；丹麦ROSCO Neo-Sensitab抗真菌药敏纸片：制霉菌素（NYS）50μg/片，氟康唑（FL）25μg/片、酮康唑（KET）15μg/片，咪康唑（MTC）10μg/片，两性霉素B（AMB）10μg/片，伊曲康唑（IT）8μg/片，由杭州康裕贸易有限公司提供；PCR使用试剂，包括Taq聚合酶以及引物的合成，由上海生工生物工程技术服务有限公司产品；……