殷 吉吉，张文龙，刘霓红，杨 涛，步志高，王君伟，吴东来*

(1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部兽医公共卫生重点开放实验室，黑龙江哈尔滨150001；2.东北农业大学动物医学学院，黑龙江哈尔滨150030)

干扰素(Interferon，IFN)分为两类：Ⅰ类IFN主要包括IFN-α、IFN-β；Ⅱ类IFN又称为IFN-γ[1]。IFN-γ具有提高MHC分子表达、增强NK细胞杀伤作用、促进巨噬细胞的吞噬能力和炎症反应等免疫调节功能。IFN-γ作为一种天然的免疫应答介导物，具有良好免疫佐剂作用。

壳聚糖(Chitosan，CS)是由甲壳素经脱乙酰化作用处理后的产物，其化学名为聚-2-氨基-2-脱氧-β-D-葡萄糖。作为一种天然的聚阳离子多糖化合物，CS广泛分布于藻类、真菌、节肢动物及贝类等软体动物的贝壳中。由于CS具有天然无毒性、良好的生物相容性、可降解、可再生性且原材料丰富、成本低等特点，有望成为广泛使用的药物载体。已有研究表明CS具有较强的核酸结合能力，可提高核酸对核酸裂解酶的稳定性[2-3]，同时由于CS具有的天然免疫活性，还能协同增强核酸免疫作用[4]。

本实验利用CS包裹含有禽源高效启动子β-acting启动子的鸡IFN-γ表达重组质粒pCAGGS-ChIFN-γ制备了CS纳米颗粒(CNPs)，并对粒径大小、Zeta电势、DNA保护性能及体外转染能力等方面进行了研究。

1 材料和方法

1.1 菌种、质粒与实验动物 鸡IFN-γ真核表达重组质粒pCAGGS-ChIFN-γ[5]、大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α感受态菌种由本实验室保存；9日龄～10日龄SPF鸡胚由本所提供。

1.2 主要试剂及仪器 CS：分子量147 ku，脱乙酰度96.2%购自山东奥康生物制品有限公司；抗鸡IFN-γ多克隆血清为哈尔滨兽医研究所刘胜旺博士提供；……