刘丽华 艾 军 孟 君 张 超 赵连梅 邵丽丽 单保恩

(河北医科大学第四医院科研中心/河北省肿瘤研究所,石家庄 050011)

肿瘤是严重影响人类健康的重大疾病。胰腺癌是最常见的消化系统肿瘤,也是临床预后最差的肿瘤之一,尚缺乏理想的治疗方法。近年来,生物治疗已成为肿瘤治疗的一种新模式,其中免疫基因治疗是通过将不同免疫分子基因导入肿瘤或免疫效应细胞,使其在机体表达并分泌细胞因子,促进肿瘤细胞的凋亡或通过增强免疫系统功能,以加速肿瘤的消退。

白细胞介素27(IL-27)是2002年Pflanz[1]报道的一种IL-6/IL-12家族细胞因子,主要来源于活化的单核巨噬细胞和树突状细胞(DC),可作用于固有免疫和适应性免疫系统的多种细胞,发挥广泛的免疫调节作用[2]。因此,IL-27作为肿瘤基因治疗的候选基因越来越受到关注。本研究将IL-27基因转染人胰腺癌细胞(Aspc1),建立荷瘤裸鼠模型,探讨IL-27的抗肿瘤作用及其免疫学机制。

1 材料与方法

1.1 材料 人胰腺癌细胞株Aspc1和空载体转染的PA317包装细胞(PA317/LXSN)由本室保存;携带重组逆转录病毒IL-27的PA317包装细胞(PA317/IL-27)由日本千叶县癌中心病理研究部田川雅敏先生惠赠;4～5周龄免疫缺陷雌性BALB/c裸鼠(体重12～14克)购自中科院北京实验动物中心;Polybrene为Sigma公司产品;Trizol为Invitrogen公司产品;DMEM、RPMI1640培养基购自Gibco公司;RT-PCR两步法试剂盒和LDH检测试剂盒购自Promega公司;IL-27、IFN-γ、TNF-α、IL-12和IL-4 ELISA 试剂盒购自Biolegend公司;主要仪器:凝胶成像分析系统FOTODYNE和DNA扩增仪PE9700(美国PE公司);酶标检测仪Biocell 2010(奥地利Anthos Labtec Instruments公司)。

1.2 方法

1.2.1 基因转染 以逆转录病毒为载体,将IL-27基因转染人胰腺癌细胞株Aspc1,方法同参考文献[3]。……