苏来金,马丽萍,徐仰丽,徐 静,周德庆

诺如病毒(Noroviruses,NVs)是引发病毒性急性肠胃炎的主要病原体之一,该病毒在离体条件下存活力很强,主要通过被污染的食物、水等多种途径进行传播〔1〕。近年来,由于水环境污染的加剧,许多水产品遭到了NVs的污染,特别是滤食性双壳贝类体内富集的NVs是周围水环境中的几十甚至上千倍〔2〕,致使世界许多地区均爆发了因生食含有NVs的双壳贝类而引发的大规模肠胃炎疫情〔3-4〕,给人类健康造成了巨大威胁。因此,水产品中NVs的污染状况调查是进行食品安全预警、防控食源性NVs疫情暴发的重要途径。目前国内外对腹泻病人粪便中诺如病毒分离株研究的报道较多〔5-7〕,证明在每一种NVs基因型中存在广泛的多样性,而对于双壳贝类中NVs含量、种类、基因型别等研究较少〔8〕,国内贝类中NVs污染状况和基因型别的调查研究尚未见报道。鉴于此,本研究对2007年9月至2008年8月在山东半岛沿海8个地区采集的186份贝类样品进行了RT-PCR检测,并对NVs阳性分离株进行了鉴定分析,旨在了解山东半岛地区贝类中NVs污染情况和毒株类型,补充我国水产品中NVs污染调查数据,为食源性NVs防治和分子流行病学调查积累资料。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品 2007年9月至2008年8月采集山东半岛的莱州、招远、烟台、威海石岛、乳山、青岛等8个地区的长牡蛎(Ostrea crassostrea)、毛蚶(Scapharca subcrenata)、栉孔扇贝(Chlamys f arreri)、虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)、菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)、缢蛏(Sinonovacula constricta)等贝类共186份样品,取内脏置-80℃保存,作为待检样品备用。

1.1.2 主要试剂与仪器 配制溶液:苏氨酸(Thr)缓冲液(0.1mol/L Thr,0.3mol/LNaCl,pH7.5);聚……