林雪群,万丽丹,薛国勇,祝高春,杨 刚

脑血吸虫病是人体感染血吸虫后,血吸虫侵犯到脑部血管,虫卵的分泌和排泄产物通过血管内皮细胞进入脑内,沉积在脑组织中,形成虫卵肉芽肿、假性结核结节或瘢痕结节,其毒素作用导致脑水肿、脑软化,造成脑组织一系列病理改变〔1〕。脑血吸虫病的病理机制一直是许多学者长期关注的问题,有学者认为血吸虫虫卵激活内皮细胞的机制除涉及到细胞内信号的改变外〔2〕,还可能和内皮细胞间的缝隙连接紧密相关。因此,我们研究和观察脑血吸虫病脑血管壁缝隙连接蛋白的表达和分布,为探查脑血吸虫病的发病机理提供形态学依据。

1 材料和方法

1.1 兔脑血吸虫病模型制作 New Zealand大白兔10只,2.0～2.5kg,雌雄不拘,1%戊巴比妥钠(40mg/kg)行耳缘静脉注射麻醉后,固定在立体定位仪上,暴露颅骨,在前囟前5 mm和右外侧3 mm钻一直径为2 mm骨孔,在额极挑破脑膜,将内径0.1 mm的PE-10管向下向后沿皮层表面方向插入1 mm,管腔中可抽到清亮脑脊液,证明位于蛛网膜下腔,再将塑料管插入脑内3mm深,可见管内有脑脊液返流,通过塑料管向颅内注射血吸虫虫卵悬液0.2mL(约含虫卵5 000个),然后用502胶水封住骨孔,缝合头皮,卫生条件下饲养。

1.2 间接血凝抑制试验(IHA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)脑血吸虫病模型实验动物术后存活30d,在1%戊巴比妥钠40mg/kg行耳缘静脉注射麻醉下,抽血和脑脊液作间接血凝抑制试验(IHA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)验证。

1.2.1 间接血凝抑制试验(IHA) 按间接血凝抑制试验试剂……