大蒜籽浸液预防日本血吸虫尾蚴感染的实验研究

2009-11-29边藏丽张万明张爱华

长江大学学报(自科版) 2009年9期

关键词：浸液血吸虫涂抹

边藏丽，张万明，夏鹏，张爱华

(长江大学医学院，湖北荆州 434023)

大蒜籽浸液预防日本血吸虫尾蚴感染的实验研究

边藏丽，张万明，夏鹏，张爱华

(长江大学医学院，湖北荆州 434023)

目的：探讨大蒜籽浸液预防日本血吸虫尾蚴感染的效果以及对皮肤的毒副作用。方法：将实验鼠随机分成3组：涂抹蒜液未清洗感染组(A组，n=24)、涂抹蒜液清洗感染组(B组，n=24)、涂抹脱氯清水感染对照组(C组，n=24)，A组小鼠皮肤涂抹大蒜籽浸液后直接用日本血吸虫尾蚴感染；B组小鼠皮肤涂抹大蒜籽浸液用泥浆水洗擦后感染日本血吸虫尾蚴, 观察防护作用，另以大蒜籽浸液涂于小鼠腹部, 观察对皮肤的毒副作用；C组小鼠腹部皮肤涂抹脱氯蒸馏水。结果：A组小鼠日本血吸虫尾蚴的感染率为零，减虫率达100.00%； B组小鼠感染率为52.38%，减虫率为80.02%，小鼠皮肤未见异常反应。结论：大蒜籽浸液涂肤有防御日本血吸虫感染的作用，对皮肤无明显毒副作用。

大蒜籽；日本血吸虫；尾蚴；小鼠

大蒜为百合科葱属植物的地下鳞茎[1]，其提取物对多种细菌、霉菌、病毒等有杀灭或抑制作用[2]，并对钉螺有杀灭作用[3，4]。我们已报道大蒜籽浸液对日本血吸虫尾蚴有较好的杀灭效果[5]。为了进一步了解大蒜籽浸液的有关作用，笔者对大蒜籽浸液涂抹皮肤预防日本血吸虫尾蚴感染的效果以及对皮肤的毒副作用进行了研究，现报道如下。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1大蒜籽浸液制备大蒜籽购自荆州市干果批发市场，由河南省杞县生产。大蒜250g，剥皮，脱氯清水洗净晾干，多功能食品粉碎机捣碎压汁即成大蒜籽液(简称蒜液)。

1.1.2尾蚴由江苏省血吸虫病防治研究所提供阳性钉螺，试验当日逸放日本血吸虫尾蚴。

1.1.3小鼠昆明种小鼠，3月龄，体质量20～24g，雌雄各半。由长江大学动物实验中心提供。

1.2方法

1.2.1防御日本血吸虫尾蚴感染实验将实验鼠随机分成3组：涂抹蒜液未清洗感染组(A组，n=24)、涂抹蒜液清洗感染组(B组，n=24)、涂抹脱氯清水感染对照组(C组，n=24)。

1)脱毛与麻醉实验前小鼠腹部剃毛(范围2cm×3cm)；皮下注射10% 水合氯醛0.1ml进行麻醉。

2)涂抹蒜液将蒜液涂抹在已麻醉的A组和B组小鼠腹部脱毛皮肤上，仅涂1次。 C组小鼠腹部皮肤涂抹脱氯蒸馏水1次。

3)清洗 B组小鼠在涂蒜液10min后，用毛笔醮泥浆水洗擦涂蒜液部位约8次，再用清水洗擦，使皮肤上蒜液基本洗净，然后用纱布擦干。

4)感染与收集虫体取日本血吸虫尾蚴(40±5)条贴于A、B、C三组小鼠腹部，感染20min。重复实验一次。40d后解剖小鼠，用灌注法加撕碎法收集虫体。首先经上腔静脉灌注冲洗，解剖镜下计数其肝、肠静脉丛内的虫体数；灌洗结束，取下肝、肠，用小镊子将肝与肠系膜拉碎，检查、计数未冲出的虫体，计算小鼠感染率、平均虫荷数以及减虫率。减虫率计算公式为:

1.2.2皮肤毒副作用实验

1)皮肤急性毒副作用实验将24只腹部剃毛小鼠归笼观察24～48h，检查皮肤有无损伤、红肿、皮疹等，无异常者开始涂抹蒜液与蒸馏水(对照组)，每组12只，1d涂3次，仅涂1d。每天观察腹部皮肤有无不良反应，观察小鼠的活动、饮食、粪便有无异常或死亡，连续观察7d后剖杀。取腹壁涂蒜液部位皮肤组织切片及主要脏器(心、肝、肾、肠)的组织切片，观察组织结构的变化。

2)皮肤慢性毒副作用实验将24只腹部剃毛小鼠归笼观察24～48h，皮肤检查无异常者涂抹蒜液与蒸馏水(对照组)，每组12只，每天涂1次，连续涂15d，结果观察同急性毒副作用实验。

1.3统计学处理率的差异性检验采用χ2检验。Plt;0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1防御日本血吸虫尾蚴感染的实验结果小鼠腹部皮肤涂抹蒜液未清洗组(A组)对日本血吸虫尾蚴的感染率为零，减虫率达100.00%；涂抹蒜液后清洗组(B组)感染率为52.38%，减虫率达80.02%。A组与C组比较血吸虫尾蚴感染率差异有统计学意义(χ2=35.02，Plt;0.01)；B组结果与C组比较血吸虫尾蚴感染率差异有统计学意义(χ2=6.39，Plt;0.05)；而A组与B组比较血吸虫尾蚴感染率差异亦有显著统计学意义(χ2=12.31，Plt;0.01)。结果见表1。

表1蒜液防御日本血吸虫尾蚴感染的实验结果

2.2皮肤毒副作用实验结果皮肤急性毒副作用实验与慢性毒副作用实验观察，小鼠腹部皮肤无损伤、红肿、皮疹等异常反应；其活动、饮食、粪便均正常，小鼠健康活泼，无死亡现象；皮肤、心、肝、肾、肠的组织切片观察组织结构正常。与蒸馏水涂抹对照组小鼠比较无明显不同。

3 讨论

日本血吸虫生长过程中唯有尾蚴能主动钻入人和动物皮肤(或粘膜)而导致感染，因此防止尾蚴侵入皮肤即可防止血吸虫感染。国内曾筛选研制了多种预防尾蚴感染的药物[6-8]，均有良好的防护作用，但或多或少地存在一些缺点，不易被群众所接受[9]。为了适应实际预防工作需要，研制新的预防尾蚴感染制剂很有必要。

我们曾报道蒜液有较好的杀灭日本血吸虫尾蚴的作用[5]，大蒜籽原液在2s内可迅速杀死日本血吸虫尾蚴，体积质量分数为50%至1.57%蒜液杀死日本血吸虫尾蚴的平均时间为6s至484s，已杀灭的血吸虫尾蚴对实验动物无感染性[5]。本次实验结果显示小鼠皮肤涂抹蒜液可以防御日本血吸虫尾蚴的感染，在涂抹蒜液未清洗的小鼠组血吸虫尾蚴感染率为零，减虫率达100.00%；涂抹蒜液清洗小鼠组其感染率为52.38%，减虫率达80.02%，两组结果与对照组比较日本血吸虫尾蚴感染率差异有统计学意义(Plt;0.05)，表明蒜液对预防日本血吸虫尾蚴感染有较好的作用，可明显的降低感染率和减虫率。而涂抹蒜液未清洗小鼠组与涂抹蒜液清洗小鼠组结果比较血吸虫尾蚴感染率差异有显著统计学意义(Plt;0.01)，表明涂抹的蒜液在该条件下清洗时，易洗掉导致小鼠感染。蒜液对皮肤毒副作用实验观察，未见小鼠的异常反应，表明蒜液对小鼠无明显的毒副作用，可用于皮肤。蒜液对预防血吸虫尾蚴感染的作用，可能与二烯丙基三硫化物等化学成分有关，其详细机制还有待进一步探讨。本次实验结果为进一步进行动物现场预防效果研究以及研制新的预防尾蚴感染制剂提供了实验依据。

[1]金燕，刘桂洁. 大蒜药理作用的研究进展[J]. 医药信息，2000，17(6)：33-35.

[2]顾银娜，黄蕴慧. 大蒜有效成分的提取及药理作用[J]. 南京军医学院学报，2000，22(4)：249-250.

[3]谢明吉，王万贤. 大蒜水浸液灭螺实验研究[J]. 湖北大学学报(自然科学版) ，2002，24(4)：357-359.

[4]严志春，胡建国，朱冬至，等. 大蒜籽液浸杀灭螺实验[J]. 中国血吸虫病防治杂志，2004，16 (3)：210-211.

[5]张爱华，边藏丽，袁岳沙，等. 大蒜籽浸液杀灭日本血吸虫尾蚴的实验研究[J]. 中国血吸虫病防治杂志，2007，19(3)：227-229.

[6]杨明瑾，漏磊君，严晓岚，等. 左旋咪唑防御日本血吸虫尾蚴感染的实验研究[J]. 中国血吸虫病防治杂志，2004，16(6)：436-439.

[7]严晓岚，杨明瑾，漏磊君，等. 长效涂肤剂“防蚴灵”预防血吸虫尾蚴感染的研究[J]. 中国血吸虫病防治杂志，2003，15(2)：135-138.

[8]张爱华, 边藏丽, 许甲凤. 中草药预防日本血吸虫尾蚴感染的效果观察[J]. 长江大学学报(自科版) 医学卷，2007，4(3)：235-236.

[9]黄轶昕，高智慧，蔡刚，等. 防蚴润肤霜防御日本血吸虫尾蚴感染的研究[J]. 寄生虫病与感染性疾病，2003，1(1)：22-24.

[编辑] 一凡

2009-04-12

湖北科技攻关计划资助项目(2006AA402C51)