黎雪华，董锦莲，周伟敏

高州市妇幼保健院妇保科，广东 高州 525200

地中海贫血（简称地贫）属于一种慢性溶血性疾病，由珠蛋白合成障碍所致，是常见的单基因遗传病。地贫患者临床症状轻重不一，患者可能无症状表现，也可能会造成严重贫血，对患者的内分泌系统及肝脏、心脏等进行损害［1］。依据珠蛋白受损程度，可分为α-地贫、β-地贫两种，其中重型α-地贫在宫内便会由于严重贫血导致胎儿水肿，造成死胎、流产或出生后不久死亡［2］。重型β-地贫于出生后3～6个月发病，多数在5岁前死亡，即使存活也需要定期进行输血治疗［3-4］。地贫的发生会给患者家庭及社会带来沉重的经济负担，增加患者心理负担，已经成为我国一个重要的公共卫生问题，妊娠合并地贫可能会增加低出生体重、早产等不良妊娠结局。目前地贫尚无根治性方法，故对同型地贫基因携带者夫妇进行产前诊断，这对预防重型地贫患儿的出生、提高人口质量具有重要影响［5］。鉴于此，本研究将分析产前基因检测在同型地贫基因携带者中应用价值，为预防地贫提供科学依据，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2019年4月—2021年4月高州市妇幼保健院进行优生优育咨询或产生检查的孕妇及配偶，采用血常规、血红蛋白电泳进行筛查，针对98对疑似为阳性地贫基因携带者夫妇进行基因诊断，其中78对夫妇双方均为α-地贫基因携带者，16对均为β-地贫基因携带者，4对为复合α、β-地贫基因携带者。孕妇年龄20～43岁，平均年龄（29.74±2.06）岁；孕周11～26周，平均孕周（17.13±1.15）周；体质量指数（BMI）18.2～30.5 kg/m2，平均BMI（25.81±2.03）kg/m2；受教育年限2～17年，平均受教育年限（11.03±2.59）年。本研究获医院医学伦理委员会批准。

1.2 入选标准

（1）纳入标准：①夫妇双方签署知情同意书。②夫妇为同型地中海贫血。③孕妇均为单胎妊娠。（2）排除标准：①合并贫血、心脏病、高血压、糖尿病等疾病。②行为异常，患有精神疾病，或认知功能、言语功能障碍，无法积极配合临床诊治。

1.3 方法

1.3.1 样本采集采用乙二胺四乙酸二钾采血管（规格为3mL），负压抽取丈夫前臂静脉血2mL×1管，共计2mL，保存于-80℃冰箱备用；同时在孕妇抽取羊水前，采用乙二胺四乙酸二钾采血管从孕妇前臂负压抽取2mL；同时对羊水进行抽取20 m L，以对基因进行检测，并分析胎儿染色体核型。

1.3.2 基因检测外周血基因组的提取采用全自动核酸提取仪（Lab-Aid824型，厦门致善生物科技股份有限公司提供），依据DNA提取试剂盒（广东凯普生物科技股份有限公司提供）说明书进行羊水基因组提取；α-地贫缺失型、α-地贫突变型和β-地贫基因检测试剂盒均购自深圳亚能生物技术有限公司，α-地贫基因诊断：采用单管多重Gap-PCR技术对α-珠蛋白基因缺失型--、-α3.7、-α4.2、--THAI进行检测；采用聚合酶链反应—反向斑点杂交法（PCR-RDB）技术测定α-珠蛋白基因突变型αCS、αQS、αWS；β-地贫基因诊断：采用PCR-RDB技术检测我国常见的17种β-珠蛋白基因突变型。

1.4 评价指标

分析基因检测结果及胎儿染色体核型结果。

2 结果

2.1 分析基因检测结果

78对α-地贫基因携带者基因检测中-SEA/αα占比最高为38.46%，--SEA/--SEA占比次之为16.67%；16对β-地贫基因携带者基因检测中CD17（A→T）/N占比最高为25.00%，CD17（A→T）/CD17（A→T）、CD26（GAG＞AAG）/N、N/N占比次之，均为12.50%；4对复合α-、β-地贫基因携带者中重型、中间型各1例，轻型2例，见表1、表2、表3。

表1 78对α-地贫基因携带者基因检测结果

表2 16对β-地贫基因携带者基因检测结果

表3 4对复合α-、β-地贫基因携带者基因检测结果

2.2 分析胎儿染色体核型

98例胎儿染色体核型分析结果显示有11例染色体正常变异，1例add（13）（p13），86例46，XN；98对夫妇均进行优生遗传咨询，其中18例重型地贫患儿均进行引产。

3 讨论

地贫在地中海地区国家，诸如土耳其、意大利及希腊等，较为常见。在我国，地贫是长江以南的地区较为常见的遗传病，地贫基因携带者约占世界人口总数的4.8%，已成为危害人类健康的常见溶血性疾病。地贫作为常见的遗传性溶血性贫血病，近年来地贫发生率不断上升，已成为影响人类健康的重要原因。地贫可分为α型、β型两种，依据临床症状及其基因型可分为重型、中间型及轻型，其中重型地贫为致死性疾病，重型地贫患儿的出生会给家庭带来严重的精神负担及经济压力，对人口质量构成严重威胁［6］。同时重型地贫缺乏有效治疗方法，故于产前诊断，并选择性终止妊娠以减少重型地贫患儿的出生，为防控地贫的重点所在［7-8］。轻型地贫患者无典型临床表现，仅需定期复查及密切观察即可，对生长发育、智力及寿命无明显影响。中间型地贫患者贫血程度不一，包括中间型β-地贫、血红蛋白H病，治疗方法较多［9］。

地贫属于常染色体隐性遗传病，其遗传方式符合孟德尔定律，夫妇双方同为地贫基因携带者，则生育重型地贫患儿的概率约为25%，若一方为地贫基因携带者，则生育子女成为地贫基因携带者概率约为50%［10-11］。本研究结果显示，同型地贫基因携带者中α-、β-地贫基因型分别以--SEA、CD17（A→T）为主，且重型地贫具有较高的检出率，同时在对同型地中海贫血基因携带者进行基因检测的同时，需要对有无其他遗传病进行观察。目前针对进行优生优育咨询或产生检查的孕妇及配偶，首先通过血常规、血红蛋白电泳进行地贫筛查，针对疑似为阳性地贫基因携带者需要进行基因诊断，诊断为同型地贫携带者的夫妇可在临床医生指导下进行产前诊断及遗传咨询，以避免重型地贫患儿的出生。妊娠合并地贫极易导致低出生体重低或早产的发生，中重型地贫胎儿极易出现贫血，导致胎儿宫内缺氧、宫内窘迫，增加低体重患儿的发生，增加剖宫产率［12-13］。携带者筛查、基因诊断、遗传咨询和产前诊断是预防重型地贫的有效措施。临床上需要加强对地贫孕妇的健康教育，促使孕妇能够深入了解并正确认识地贫对妊娠结局的不良影响，促使孕妇围产保健意识得以提高，提高胎儿地贫产前诊断的依从性。产前诊断是实现地贫预防目标的最后屏障，开展地贫产前筛查及诊断对减轻家庭及社会负担、提高人口素质具有重要作用，尤其需要重视对重型地贫的产前诊断，在发现重型地贫胎儿时，需要对孕妇及其家属做好相关遗传指导，基于孕妇及其家属知情与自愿原则，对重型地贫胎儿采取干预措施［14-15］。但本次研究中纳入样本量小，且未对妊娠结局及新生儿指标进行分析，可能会对研究结果准确性造成一定影响，还有待临床深入分析研究，以进一步分析产前基因检测在同型地中海贫血基因携带者中应用价值，为同型地中海贫血基因携带者的产前诊断工作的实施及围生期保健提供确切参考，为提升地贫的防治水平助力。

综上所述，在同型地贫基因携带者中进行产前基因检测能够防止重型地贫患儿的出生，其中α、β-地贫基因型分别以--SEA、CD17（A→T）为主，需要依据产前基因检测结果为孕妇及其家属提供有效的遗传咨询。