沈文英 屠昌鹏 陈涵丰 龚 芬 王建军

（1.浙江省玉环市农业农村和水利局，浙江 玉环317600；2.浙江省农业科学院作物与核技术利用研究所，浙江 杭州310021）

玉环剪豆是一种软荚豌豆，为浙江省玉环市地方特色蔬菜品种，在当地种植历史悠久，因使用剪刀采收豆荚而得名。玉环剪豆的嫩荚色泽翠绿，口感清脆，鲜美爽口，可炒食、做菜饭，且熟性强。玉环剪豆生长势强，适应性广，易种植（不用搭支架），秋末采收上市，可填补蔬菜市场供应淡季，经济效益较高。收获后残留的豆荚茎和叶可用作饲料或绿肥。

1 特征特性

玉环剪豆根系发达，可深入土壤层1 m以下，有根瘤菌；茎半直立，偶尔发生分枝，茎长约1 m、圆形中空；叶互生为羽状复叶，小叶2～3对，顶端呈卷须状，叶柄与茎交界处有2片托叶，叶片表面有明显不规则白色斑点及蜡粉；始花一般在主蔓上，花蝶形紫红色，每节叶腋独立，叶腋花青斑明显；主蔓可生10个荚以上，豆荚扁长绿色、长宽比为5∶1，平均荚长6 cm、宽1.2 cm；嫩荚百荚重约150 g，腹侧缝隙两侧单行，鲜荚壁较其他剪豆品种薄，熟豆荚干缩，种子呈皱粒状，种皮有小褐色斑点，千粒重为232.15 g。

2 栽培要点

玉环剪豆播种期和鲜荚采摘期较长，玉环地区8月至翌年1月均可播种。10月份播种，翌年1月开始开花，嫩豆一直可采收至4月份，嫩荚产量300～400 kg/667 m2，高的可达500 kg/667 m2以上；8月上旬播种，10月份开始采收豆荚，采收至翌年2～3月，可采收10次以上。播种早，采收豆荚批次多，产量高。若肥水供应充足，植株基部可再抽生分枝，分枝可继续结荚，有利于延长豆荚采收期和提高豆荚产量。玉环剪豆主要以嫩荚供食用，嫩荚自下而上逐渐成熟，需及时采收。一般开花后10 d左右，荚壁微凸、籽粒还没完全发育时采摘（每3 d采收1次），此时荚色嫩绿，荚壳肥嫩，品质最佳。采摘过早产量低，采摘过晚则籽粒中淀粉含量增高，鲜味下降。嫩荚采收后不可长时间置于袋子内，以免嫩荚因呼吸作用变色而降低商品性[1]。

3 DNA指纹图谱构建

为鉴定与评价玉环剪豆与其他剪豆品种的差异性，显示其地方特色，我们选择在玉环地区具有较大影响力的其他剪豆品种大溪剪豆与玉环剪豆进行DNA指纹图谱构建。

3.1 材料与方法

3.1.1 试验材料

供试材料为大溪剪豆、玉环剪豆。

3.1.2 试验方法

（1）基因组DNA提取：取适量玉环剪豆和大溪剪豆幼嫩叶片，采用CTAB-氯仿-异戊醇法提取剪豆基因组DNA（Liueta1.，2007）。（2）PCR与产物检测：剪豆PCR反应体系20µL，包括模板DNA（10 ng/µL）2.0µL，10×buffer 2.0µL、dNTPs（10 mmol/L）2.0µL、primer（10 mmol/L）1.0µL、TaqPloymerase（2 U/µL）0.5µL、ddH2O 12.5µL。PCR反应程序为94℃5 min、94℃45 s、51℃45 s、72℃1.5 min，共35循环；72℃10 min，16℃保存。跑电泳时，琼脂糖胶浓度为2.5%。

3.2 凝胶电泳结果与分析

利用6对ISSR标记引物（6对ISSR标记引物序列见表1）对玉环剪豆和大溪剪豆基因组DNA进行PCR扩增鉴定[2～4]。扩增鉴定结果见图1（每对ISSR标记左侧条带为玉环剪豆，右侧为大溪剪豆）。

表1 6对ISSR标记引物信息

图1 6对ISSR标记对玉环剪豆和大溪剪豆的扩增结果

由图1（凝胶电泳结果）可知，6对ISSR标记引物对玉环剪豆和大溪剪豆基因组DNA扩增后均表现出差异。其中UBC 807和UBC 825标记在玉环剪豆中扩增出1条带，而在大溪剪豆中扩增出2条带；UBC 8和UBC 861在玉环剪豆中扩增出2条带，而在大溪剪豆中扩增出1条带；UBC 41和UBC 817在玉环剪豆中扩增出2条带，而在大溪剪豆中未能扩增出相应的条带。可见，利用以上6对ISSR标记可对玉环剪豆和大溪剪豆进行指纹图谱鉴定。2个剪豆品种的DNA扩增结果显示出其品种间的多态性差异，突出了玉环剪豆的地方品种特色。