（宁波市医疗中心李惠利医院东部院区 泌尿外科，浙江 宁波 315040）

膀胱癌发病机制复杂，膀胱癌生长依赖新生血管，膀胱癌细胞需要的大部分营养由血管供应，血管新生为膀胱癌细胞分裂、增殖和侵袭转移提供了条件[1]。血管生成受血管生成调节因子调节。血小板因子4（platelet factor 4, PF4）具有抑制恶性肿瘤血管生成的作用，在肝癌等恶性肿瘤中发挥重要作用[2]。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）为血管生成重要的调控因子，缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α）在血管生成中也发挥重要作用[3-4]。本文对血清PF4水平与膀胱癌、VEGF、HIF-1α的相关性进行研究，探讨血清PF4在膀胱癌中的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2014年1月—2015年12月宁波市医疗中心李惠利医院泌尿外科收治的膀胱癌患者130例作为膀胱癌组，选取本院健康体检者130例作为对照组。膀胱癌组中男性77例，女性53例；平均年龄（63.42±9.53）岁；肿瘤平均直径（3.32±1.18）cm，肿瘤分期：Ta期19例、T1期31例、T2期30例、T3期43例及T4期7例；肿瘤分级：低级别65例、高级别65例；有淋巴结转移59例、无淋巴结转移71例。对照组男性72例，女性58例；平均年龄（63.64±9.73）岁。纳入标准：对照组身体健康；膀胱癌组患者经术后病理确诊为膀胱癌，首次诊断患者，术前未进行放化疗及生物靶向治疗等其他治疗，术后随访3年，病历资料及随访资料完整。排除标准：严重肝、肾等脏器功能异常者，其他恶性肿瘤者，血液系统疾病者，自身免疫性疾病者，近1个月内免疫制剂及激素治疗者。两组性别、年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。患者均签署知情同意书。本研究经医院伦理委员会审批。

1.2 方法

收集膀胱癌组患者术前静脉血和对照组体检当天静脉血，采用ELX800全自动酶免分析仪（美国宝特）测定血清PF4、HIF-1α及VEGF水平。

1.3 统计学方法

数据分析采用SPSS 20.0统计软件。计量资料以均数±标准差（±s）表示，比较用t检验；膀胱癌预后影响因素采用Cox比例风险回归模型；相关分析用Pearson法，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清PF4、HIF-1α及VEGF水平比较

两组血清PF4、HIF-1α及VEGF水平比较，经t检验，差异有统计学意义（P＜0.05），膀胱癌组均高于对照组。见表1。

表1 两组血清PF4、HIF-1α及VEGF水平比较（n =130，±s）

表1 两组血清PF4、HIF-1α及VEGF水平比较（n =130，±s）

组别 PF4/（ng/ml） HIF-1α/（μg/L）VEGF/（pg/ml）对照组 0.17±0.10 4.63±0.84 7.13±1.24膀胱癌组 0.42±0.14 24.16±1.01 18.76±1.37 t值 16.568 169.508 70.982 P值 0.000 0.000 0.000

2.2 不同因素膀胱癌患者血清PF4水平比较

不同肿瘤分期患者血清PF4水平比较，经t检验，差异有统计学意义（P＜0.05），T2～T4患者高于Ta、T1患者；不同性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤分级、淋巴结转移患者血清PF4水平比较，经t检验，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

2.3 膀胱癌预后的Cox分析

单因素Cox分析结果显示，肿瘤大小、肿瘤分期、淋巴结转移、血清PF4、HIF-1α及VEGF水平与膀胱癌的预后有关（P＜0.05）。见表3、4。

将膀胱癌预后作为因变量，将单因素分析中差异有统计学意义的因素作为自变量纳入Cox回归模型。引入水准为0.05，剔除水准为0.10。多因素分析结果显示，肿瘤分期、淋巴结转移、PF4、HIF-1α及VEGF水平为膀胱癌预后的独立危险因素（P＜0.05）。见表5。

2.4 膀胱癌患者血清PF4与血清HIF-1α、VEGF水平的相关性

膀胱癌患者血清PF4与血清HIF-1α、VEGF水平呈正相关（r=0.591和0.624，均P=0.000）。

表2 不同因素膀胱癌患者血清PF4水平比较（ng/ml，±s）

表2 不同因素膀胱癌患者血清PF4水平比较（ng/ml，±s）

因素 n PF4 t值 P值性别男77 0.43±0.05 1.789 0.077女53 0.41±0.07年龄≥65岁 71 0.44±0.09 1.710 0.090＜65岁 59 0.41±0.11肿瘤大小≥3 cm 67 0.43±0.10 1.894 0.061＜3 cm 63 0.40±0.08肿瘤分期Ta、T1 50 0.34±0.07 16.464 0.000 T2～ T4 80 0.53±0.06肿瘤分级低65 0.44±0.12 1.900 0.060高65 0.40±0.12淋巴结转移有59 0.43±0.11 1.871 0.064无71 0.39±0.13

表3 膀胱癌预后影响因素的赋值参数

续表3

表4 膀胱癌预后的单因素Cox分析参数

表5 膀胱癌预后的多因素Cox分析参数

3 讨论

膀胱癌是常见的恶性肿瘤之一，其生长具有血管依赖性，血管新生是膀胱癌发生、发展的关键，是局部浸润和远处转移的主要因素[5]。新生血管的发生受血管生成调节因子调节，正常情况下，促血管生成因子和抑制血管生成因子处于平衡状态，在多种内外因素的作用下，上述平衡被打破，当促血管生成因子占优势时，血管内皮细胞受到刺激产生金属蛋白酶等溶解细胞外基质，使血管内皮细胞以出芽的方式形成新生血管，从而促进恶性肿瘤的发生、发展及侵袭、转移；当抑制血管生成因子占优势时则抑制新生血管生成[6]。

PF4基因位于4号染色体上，主要由巨核细胞合成，少数由成熟血小板合成。PF4蛋白储存在血小板a颗粒中，当血小板活化时PF4蛋白以PF4-蛋白多糖复合物形式从血小板α颗粒释放到血液中[7-8]。近年来研究发现PF4在恶性肿瘤的发生、发展中具有重要作用，如PF4可促进肺癌生长，可诱导乳腺癌细胞生长和凋亡，并抑制肿瘤转移[9-12]。检测恶性肿瘤血清PF4水平也具有重要意义，如肝细胞癌患者血清PF4水平升高，血清PF4水平随肝细胞癌分期的升高而升高，可作为肝细胞癌诊断、鉴别诊断和分期的依据[13]。膀胱癌患者血清PF4水平尚不清楚，本文对膀胱癌患者血清PF4水平进行研究，发现膀胱癌患者血清PF4水平升高，血清PF4水平与膀胱癌患者的分期关系密切，膀胱癌分期越高血清PF4水平越高，血清PF4为膀胱癌预后的独立影响因素。本研究结果表明检测膀胱癌患者血清PF4水平也具有重要意义，血清PF4水平在膀胱癌的诊断、分期及预后评估中具有一定价值。

VEGF为研究比较多的促血管生成因子，VEGF可通过和受体结合促进血管生成；VEGF在恶性肿瘤的发生、发展及侵袭、转移中也具有重要作用：VEGF通过与受体结合作用于血管内皮细胞，促进血管内皮细胞增殖和生长[14]；诱导恶性肿瘤血管和淋巴管生成，促进恶性肿瘤生长和转移[15]。PF4为与VEGF相关联的一种血管生成调节因子，具有抑制血管生成的作用，PF4可通过抑制VEGF受体激活抑制血管生成，也可通过抑制VEGF诱导的内皮细胞再生抑制血管生成。PF4和VEGF在肝癌中呈显著相关性，共同参与肝癌的发生、发展[16]。HIF-1α作为一种转录因子，在细胞应对缺氧环境时发挥关键作用，在多种缺氧反应中发挥调控作用[17]；HIF-1α在多种恶性肿瘤中也表达异常，和恶性肿瘤的血管生成关系较密切[18]。HIF-1α在参与血管生成中和PF4具有一定关系，如PF4和HIF-1α联合可通过协同作用抑制肝细胞癌裸鼠皮下移植瘤的血管生成[19]。本文发现血清PF4与血清HIF-1α、VEGF呈正相关，分析PF4和VEGF作为血管生成相关因子，在体内通过反馈机制维持人体内环境稳定，当肿瘤组织中VEGF生成增加时，VEGF进入血液循环，导致血清中VEGF水平升高，血清VEGF诱导巨核细胞合成和释放PF4，反馈性抑制VEGF，以维持体内血管生成，PF4和HIF-1α在血管抑制作用中具有协同作用，共同反馈性抑制VEGF对血管生成的促进作用。

综上所述，膀胱癌患者血清PF4水平升高，血清PF4水平在膀胱癌的诊断、分期和预后评价中具有一定参考价值，PF4可能通过抑制血管生成机制参与膀胱癌的发生、发展。