梁　霞（深圳市宝安区妇幼保健院　深圳　518100）



金葡球菌和肺炎链球菌在体内对莫西沙星耐药性分析

梁霞（深圳市宝安区妇幼保健院深圳518100）

摘要：目的：分析金葡球菌和肺炎链球菌在体内对莫西沙星的耐药性。方法：采用大鼠肉芽肿袋模型，体内试验选用野生株、第一代耐药株以及多代耐药株，使用不同菌株感染大鼠产生肉芽肿袋后分为A、B、C3个组，用莫西沙星进行不同剂量用法治疗，每天收集肉芽肿袋的渗出物，根据耐药株的产生测定金葡球菌与肺炎链球菌对莫西沙星的耐药性。结果：由于莫西沙星对试验菌株与大鼠肉芽肿袋中分离菌的MIC相同，所以敏感性无显著变化。两种感染病原体A组与B组的试验结果相同，A组治疗1d后肺炎链球菌减少约107CFU·mL-1，A组治疗1d后金葡球菌的减少数量较慢，3d后减少数量明显。B组的肺炎链球菌与金葡球菌的生存率都迅速下降，但减少幅度差异不明显，莫西沙星对细菌生存数量的影响可持续6d，影响期间细菌没有发生再生长，莫西沙星对肺炎链球菌的杀菌能力高于对金葡球菌的杀菌能力。同时B组与C组对比，50mg·kg-1·d-1的莫西沙星杀菌速度和程度都会明显降低，但杀菌效果仍在，治疗1d后细菌可降低103CFU·mL-1，效果持续4d，但50mg·kg-1·d-1的莫西沙星、感染后24h治疗对多代耐药株的疗效几乎为零。结论：即使人体内莫西沙星的浓度低于预期的治疗浓度，也对金葡球菌与肺炎链球菌的野生株与第一代耐药株具有良好的杀菌效果。

关键词：金葡球菌肺炎链球菌莫西沙星耐药性

莫西沙星是一种新型8-甲氧基氟喹诺酮类抗菌药物［1］，1999年首次在德国上市，目前在我国上市的产品有莫西沙星片、莫西沙星胶囊以及莫西沙星注射液［2］，相比其他广谱氟喹诺酮类药物，具有更强的莫西沙星抗G+菌活性、不典型致病菌活性以及厌氧菌活性，同时保持了对G-菌的抗菌活性［3］。有研究报道称，莫西沙星的抗菌活性很强，可能具有多种抗菌机制，所以有可能降低耐药菌株的产生［4］。本次研究为了探讨金葡球菌和肺炎链球菌在人体内对莫西沙星的耐药性，采用动物肉芽肿袋模型，该模型由于是同一动物品系在一个致病菌容器，所以获取标本较为容易，随时可检测抗菌活性且变异性小，同时动物肉芽肿袋中的宿主排斥减轻，可在细胞排斥干扰最小的情况下检测出细菌与抗菌药物之间的关系。

1　资料与方法

1.1菌株的选择：所选的金葡球菌菌株为甲氧西林和环丙沙星敏感株No.133，莫西沙星的形态学、免疫学及细胞遗传学（MIC）分型为0.06mg·L-1。肺炎链球菌株为No.4241，莫西沙星的MIC为0.12mg·L-1。

1.2菌株的耐药性：将细菌放置于含有2倍稀释度莫西沙星的脑心浸出液肉汤中，莫西沙星的浓度为0.01～1204mg·L-1，放置时间为一夜［5］，选择MIC超过原始MIC1倍的菌株作为第一代耐药株，同时选择细菌生长最高药物浓度的样本，将其稀释20倍，继续接种于不同浓度药物的培养基中放置一夜，重复传代至金葡球菌的MIC到2mg·L-1，23代；肺炎链球菌MIC到1mg·L-1，17代，将其作为多代耐药株。

1.3方法：采用大鼠肉芽肿袋模型检测细菌生长情况与较长时间内的细菌耐药情况，选择雌性Wistar大鼠、重量在120～160g之间的作为模型对象，在其肩胛间皮下软组织中注射25mL过滤空气，形成空腔，随后立即在空腔中注射巴豆油，于7d后当大鼠肉芽肿袋中充满渗出物时注射致病菌［6］。金葡球菌与肺炎链球菌的最初生存率大约为108CFU·mL-1渗出液。使用不同菌株感染大鼠产生肉芽肿袋后分为A、B、C3个组，每组10只大鼠，A组大鼠肉芽肿袋模型于感染1h后进行治疗，给予100mg·kg-1· d-1的莫西沙星灌胃治疗；B组大鼠肉芽肿袋模型于感染24h后进行治疗，给予100mg·kg-1·d-1的莫西沙星灌胃治疗；C组大鼠肉芽肿袋模型于感染24h后进行治疗，给予50mg·kg-1·d-1的莫西沙星灌胃治疗。每天在给药前收集大鼠肉芽肿袋的渗出物标本，接种于不含药物的培养基中，检测CFU水平，同时接种于含有莫西沙星的培养基中检测是否产生耐药性。

1.4统计学方法：采用SPSS20.0统计学软件分析数据，计数资料用率（%）表示，采用X2检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2　结果

2.1莫西沙星对金葡球菌与肺炎链球菌菌株的MIC：观察发现，莫西沙星对金葡球菌野生株的MIC为0.06mg·L-1，对金葡球菌第一代耐药株的MIC为0.12mg·L-1，对金葡球菌多代耐药株的MIC为1.0mg·L-1。莫西沙星对肺炎链球菌野生株的MIC为0.12mg·L-1，对肺炎链球菌第一代耐药株的MIC为0.25mg·L-1，对肺炎链球菌多代耐药株的MIC为2.0mg·L-1。详情见表1。

表1　莫西沙星对金葡球菌与肺炎链球菌菌株的MIC（mg·L-1）

2.2莫西沙星治疗后从感染袋中分离出的菌株的敏感性：观察发现，由于莫西沙星对试验菌株与大鼠肉芽肿袋中分离菌的MIC相同，所以敏感性无显著变化，详情见表2。

2.3金葡球菌与肺炎链球菌对莫西沙星的耐药性：实验结果发现，两种感染病原体A组与B组的试验结果相同，A组治疗1d后肺炎链球菌减少约107CFU·mL-1，A组治疗1d后金葡球菌的减少数量较慢，3d后减少数量明显。B组的肺炎链球菌与金葡球菌的生存率都迅速下降，但减少幅度差异不明显，莫西沙星对细菌生存数量的影响可持续6d，影响期间细菌没有发生再生长，莫西沙星对肺炎链球菌的杀菌能力高于对金葡球菌的杀菌能力。同时B组与C组对比，50mg·kg-1·d-1的莫西沙星杀菌速度和程度都会明显降低，但杀菌效果仍在，治疗1d后细菌可降低103CFU·mL-1，效果持续4d，但50mg·kg-1·d-1的莫西沙星、感染后24h治疗对多代耐药株的疗效几乎为零。

3　讨论

莫西沙星的化学结构与其他氟喹诺酮类药物的不同具有显著性，因8位碳甲氧基的引入，扩大了抗菌谱，在保留早期氟喹诺酮类药物对G-菌抗菌活性的同时，增强了对G+球菌、非典型病原体的抗菌活性，其抗菌活性明显优于第三代氟喹诺酮类药物［7～8］。莫西沙星的杀菌机制主要是通过抑制细菌DNA螺旋酶或拓扑异构酶达到抑制细菌生长的目的，氟喹诺酮类药物早期只能单纯抑制拓扑异构酶，但莫西沙星能够起到同时抑制拓扑异构酶以及DNA螺旋酶作用，所以导致细菌的耐药性发展缓慢，呈现出低水平的耐药性，只有在致病菌中的两个靶酶基因编码同时发生突变时才会出现耐药［9～10］。本次研究中也发现，莫西沙星在人体内对金葡球菌与肺炎链球菌的野生株与第一代耐药株具有良好的杀菌作用，即使浓度低于预期治疗浓度，也可见良好的杀菌效果。

表2　莫西沙星治疗后从感染袋中分离出的菌株的敏感性

参考文献

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Staphylococcus auras and Streptococcus pneumatic analysis of tamoxifen resistance in vino

Abstract：Objective：Staphylococcus auras and Streptococcus pneumatic in the tamoxifen resistance in vino. Methods：Rats bags granular，wild strains were selected and in vino，as well as the first generation of drug-resistant strains of drug-resistant strains of many generations after using different strains of rats infected produce granules bags into A，B，C3 groups，with different doses of tamoxifen therapy usage，gather daily granular pouch exude was measured Staphylococcus auras and Streptococcus pneumatic resistance to tamoxifen according resistant strains. Results：Since tamoxifen rat granular pouch test strain isolates MIC same，so no significant change sensitivity. Both pathogens A group with the test results the same group B，group A after treatment 1d by about 107CFU·mL-1Streptococcus pneumatic，group A after treatment 1d reduce the number of Staphylococcus aureus slow，3d after reducing significantly the number. Group B Streptococcus pneumatic and Staphylococcus auras survival are rapidly decreased，but the decrease was not significantly different amplitude，the bacteria did not occur during the re-growth of bacteria affect the survival of tamoxifen sustainable 6d，influence，and tamoxifen Streptococcus pneumatic is higher than for bactericidal capacity Staphylococcus auras bactericidal capacity. While group B and group C contrast，50mg·kg-1·d-1tamoxifen sterilization speed and extent will significantly reduce，but still bactericidal effect，bacteria can reduce treatment 1d days 103CFU·mL-1，the effect lasts 4 days，but 50mg·kg-1·d-1of tamoxifen，24h post -infection therapy on multiple generations of resistant strains is almost zero. Conclusion：Even if the body Modishness stars concentrations below the expected therapeutic concentrations，still wild strains of Staphylococcus auras and Streptococcus pneumatic and the first generation of drug-resistant strains has a good bactericidal effect.

Key words：Staphylococcus auras Streptococcus pneumatic Tamoxifen Resistance

中图分类号：R965

文献标识码：B

文章编号：1672-8351（2016）06-0168-02