张晨雨，杨贺佳，苏迎春

郑州大学第一附属医院生殖医学中心 郑州 450052

卵巢早衰与非早衰者受卵IVF-ET治疗结局分析

张晨雨，杨贺佳，苏迎春#

郑州大学第一附属医院生殖医学中心 郑州 450052

关键词赠、受卵；赠卵数目；妊娠结局；卵巢早衰

摘要目的：探讨卵巢早衰(POF)、非POF患者受卵IVF-ET的治疗结局及影响因素。方法：回顾性分析2012年11月至2015年1月于郑州大学第一附属医院生殖医学中心行受卵冻融胚胎移植助孕的267例POF、非POF患者和267例同期行赠卵IVF/ICSI患者的治疗情况及妊娠结局。结果：POF、非POF受卵者每个IVF周期的受卵数分别为3.98、4.13个。赠卵者新鲜移植胚胎周期和解冻移植胚胎周期的临床妊娠率分别为52.50%、63.53%，受卵POF组、非POF组解冻移植胚胎周期的临床妊娠率分别为62.96%、51.59%，4组间差异无统计学意义(P=0.099)。受卵非POF解冻移植胚胎周期的单胎活产率低于赠卵新鲜移植胚胎周期和解冻移植胚胎周期(P<0.05)。赠、受双方IVF/ICSI周期的受精率、胚胎形成率、优质胚胎形成率及胚胎移植周期的胚胎种植率比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。结论：赠卵IVF-ET治疗中适当减少赠卵数并不影响赠、受卵者的治疗结局。

目前，体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)已是一项较成熟的辅助生殖技术，其中，因卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)或其他因素导致产生卵子能力丧失、女方为严重遗传性疾病患者或携带者等不孕患者可考虑接受赠卵IVF-ET助孕治疗。作者将2012年11月至2015年1月期间于郑州大学第一附属医院生殖医学中心行受卵冻融胚胎移植的POF患者和非POF患者分别与同期赠卵者的体外受精治疗情况进行对照研究，分析目前赠、受双方助孕治疗的临床结局及相关影响因素。

1对象与方法

1.1研究对象选取2012年11月至2015年1月于郑州大学第一附属医院生殖医学中心行受卵冻融胚胎移植助孕的患者267例，其中POF患者87例(移植周期54个)，非POF患者180例(移植周期126个)。POF的诊断标准为：40岁以前出现至少4个月以上闭经，并有2次或以上血FSH>40 U/L(2次检查间隔1个月以上),雌二醇<73.2 pmol/L[1]。非POF组包括：卵巢功能反应低下(poor ovarian response,POR)117例，家族性遗传病2例，女方染色体异常且行PGD未有正常信号囊胚形成或拒绝行PGD要求行供卵助孕44例，反复IVF-ET助孕失败(包括多次促排卵均示卵子不熟或质量低下、由于卵子因素导致的体外低受精或不受精及胚胎质量低下或无胚胎形成、空卵泡综合征等)17例。其中POR的诊断采用博洛尼亚标准[2]。 同期行IVF/ICSI-ET且自愿捐赠卵子者共267例，均为郑州大学第一附属医院生殖医学中心行第1周期IVF/ICSI的患者，年龄均≤35岁，取卵日获卵数≥17个，其条件均符合卫生部卫科教发[2003]176号修订的《人类辅助生育技术规范》与《卫生法则》中关于赠卵者要求的规定。

赠、受卵双方夫妇在充分知情且绝对双盲的前提下，签署赠卵协议书后进行卵母细胞捐赠。 赠、受卵夫妇在进入治疗周期前必须接受详细的检查,包括肝肾功能、乙型及丙型肝炎、人类免疫缺陷病毒(HIV)、梅毒、凝血功能和心血管等其他系统检查及传染病检查。同时，受卵者的子宫具备接受胚胎种植的条件。

1.2治疗方法赠、受卵者IVF/ICSI：赠卵者均采用常规黄体期长方案促排卵[3]，取卵、授精、胚胎移植及黄体支持均按常规进行[4]，其中胚胎评分按照Peter评分方法[5]进行。对赠卵患者中有中、重度卵巢过度刺激综合征倾向、肝功能异常、凝血功能异常等情况者，不行新鲜周期移植，将胚胎冷冻，于后期行冻融胚胎移植。受卵者IVF/ICSI周期中卵子授精、胚胎培养及评分同赠卵者，胚胎形成后全部冷冻，待后期解冻移植。受卵者胚胎形成6个月后需复查赠者HIV 抗体，结果显示正常再行胚胎解冻，对受者进行移植, 移植胚胎数同赠卵者标准。

解冻周期子宫内膜的准备：包括自然周期和人工周期。对于月经周期规律(周期26～32 d)且排卵正常者采用自然周期，即月经来潮的第7～8天就诊，B超监测卵泡发育和排卵、子宫内膜的厚度变化情况。 B超监测排卵日为第1天,开始肌内注射黄体酮针(20 mg/支,浙江仙琚制药)40 mg/d，第4天加服达芙通 20 mg/d，解冻并移植胚胎。对于无卵巢功能或月经周期不规律(周期≥33 d或<25 d)、既往自然周期监测排卵障碍或曾经出现过内膜薄者采用人工周期，其内膜准备方案、胚胎移植及黄体支持采用常规方法[6]。

胚胎冷冻方法：全部胚胎采用常规玻璃化冷冻方法进行解冻复苏。

妊娠的监测：胚胎移植术后第14、18天查血人绒毛膜促性腺激素确定是否妊娠，移植术后第35天查B超确定是否临床妊娠，若B超示宫外妊娠需及时治疗；若为宫内妊娠，记录孕囊数、胎心胎芽发育情况，孕囊数≥3个则必须行减胎术。

1.3统计学处理采用SPSS 21.0进行数据分析。赠、受卵组间的年龄、不孕时间、基础FSH水平、窦卵泡数、ET日子宫内膜厚度、移植胚胎数等的比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t检验；受精率、卵裂率、胚胎形成率、优质胚胎形成率及妊娠结局的比较采用χ2检验。检验水准α=0.05。

2结果

2.1赠、受卵双方基本情况及IVF/ICSI周期一般治疗情况的比较赠卵组中原发不孕和继发不孕的患者分别为171、96例；受卵POF组中原发不孕和继发不孕的患者分别为73、14例；受卵非POF组中原发不孕和继发不孕的患者分别为74、106例；其中接受赠卵的POF、非POF患者在IVF周期中的受卵中位数分别为3.98、4.13个。2组其他情况比较见表1、2。

表1　赠、受卵双方一般情况比较

#：与受卵POF组比较，P<0.05;*：与受卵非POF组比较，P<0.05。

表2　赠卵组与受卵组IVF/ICSI一般治疗情况比较　%

*:1例患者因第3天胚胎未卵裂而无可移植胚胎形成。

2.2赠、受卵双方移植周期及妊娠结局的比较见表3。

表3　受卵POF组、非POF组与赠卵新鲜移植胚胎周期组、解冻移植胚胎周期组妊娠结局比较

赠卵解冻移植胚胎周期中1例患者将2枚胚胎解冻后行囊胚培养；*:包括早、中、晚期流产；#：与赠卵新鲜胚胎移植周期组和解冻移植胚胎周期组比较，P<0.008。

3讨论

自1978年世界上第1例试管婴儿成功分娩以来，辅助生殖技术已为千千万万不孕不育家庭带来了幸福。然而，对于POF、POR、女方染色体异常或家族性遗传病等无法通过自身配子来获得健康后代的女性来说，目前赠卵仍是最有效的助孕手段。

我国相关法律规定受卵治疗中的卵子仅能来自人类辅助生殖治疗周期中的剩余卵子，但同时又必须保证赠卵者的自身利益及治疗结局在卵子捐赠后不受影响。Kolibianakis等[7]指出，当赠卵者获卵数>8个时，卵子随机均分于赠、受双方(同时赠卵者均保留较多的卵子)，即平均赠卵数为6个时，受卵方没有取消移植者。马晓玲等[8]也通过临床分析验证了该结论。Sharma 等[9]对2 708个IVF周期进行回顾性分析，结果显示，无论年龄≤35岁或>35岁，获卵数≤5个，其累计妊娠率均明显降低。近年来，随着试管婴儿技术的不断完善和提高，IVF治疗更加强调安全性，重视获得较好的妊娠结局，而不再单纯追求较高的获卵数，因此在赠卵助孕治疗中赠卵数目的最佳阈值(cut-off值，即妊娠率出现明显差异)成为关注的热点问题。根据博洛尼亚标准[2]，POR患者在常规刺激方案中的获卵数cut-off值为3个，该中心赠卵数目由初期的不超过5个逐渐减少至3～4个。该研究结果显示，POF、非POF患者每IVF周期的受卵数分别为3.98、4.13个，其中，受卵非POF组中仅有1例患者因第3天胚胎未卵裂而无可移植胚胎形成，而赠、受卵双方的受精率、卵裂率、胚胎形成率、优质胚胎形成率差异均无统计学意义，且在胚胎移植周期中，其胚胎种植率、临床妊娠率也未见差异，双方均获得了较满意的妊娠结局。因此，在目前的临床治疗中，适当减少卵子捐赠数目并不影响赠、受卵双方的助孕结局，同时也能更好保护赠卵者的利益。

有研究[10]指出：与常规IVF周期比较，受卵周期有更好的妊娠结局。但之后更多的研究[8，11]却发现，赠、受卵患者的胚胎种植率及临床妊娠率并无差异。该研究中，接受新鲜周期促排卵治疗并行卵子捐赠的患者共267例，其新鲜周期的胚胎种植率、临床妊娠率分别为34.18%、52.50%；在之后的解冻周期中，赠卵患者共行胚胎移植周期85个，其胚胎种植率和临床妊娠率分别为39.44%、63.53%。与同期行受卵解冻胚胎移植助孕治疗的POF患者、非POF患者分别进行比较，双方的胚胎种植率和临床妊娠率差异均无统计学意义。这提示在目前的赠卵助孕治疗中，赠、受卵双方均可获得较理想的治疗结局。

在双方妊娠结局的比较中作者发现，受卵非POF组解冻周期的单胎活产率(29.23%)低于赠卵组的新鲜周期(33.33%)和解冻周期(40.74%)，而赠卵组新鲜周期和解冻周期的临床妊娠率、单胎活产率、双胎活产率也均高于前者，同时流产率低于该组。在2组一般情况的比较中，赠卵组患者的年龄要明显低于受卵非POF组，而受卵非POF患者中继发不孕者较多。在接受赠卵助孕治疗中，高龄患者虽然可以通过卵子捐赠获得质量较好的卵子和胚胎，并通过人工周期达到较满意的子宫内膜厚度，但由高龄造成的高流产率、低活产率等不良妊娠结局仍是不可避免的；同时，既往药物流产和清宫操作也可能会影响再次妊娠的临床结局，因此建议有受卵指征的患者尽早就诊。

赠卵治疗是一项重要的人类辅助生殖技术，其在保证赠卵患者获得较好助孕结局的同时，更为POF、POR、女方染色体异常等卵子异常的不孕患者带来了福音。目前随着助孕技术的不断进步，胚胎种植率和临床妊娠率均明显提高，适当减少卵子捐赠数目并不影响受卵者的治疗结局，也更好地保护了赠卵者在助孕治疗中的利益。然而，该研究的样本量较小，具有自身的局限性，对目前临床治疗中赠卵数目cut-off值的确定仍需要进一步研究。

参考文献

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Effect of reducing number of donated eggs on IVF-ET outcomes of eggs recipients

ZHANGChenyu，YANGHejia,SUYingchun

ReproductiveMedicineCenter,theFirstAffiliatedHospital,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052

Key wordsegg donor,recipient;number of donor egg;pregnancy outcome;premature ovarian failure

AbstractAim: To investigate the influence of reducing the number of donated eggs on the IVF-ET outcomes of eggs recipients with and without premature ovarian failure(POF).Methods: Retrospective clinical study of 267 patients received eggs that was performed in POF and non-POF and 267 patients donated eggs from Nov.2012 to Jan.2015.Results: In each IVF cycle,the number of eggs received by patients with POF and without POF were 3.98 and 4.13,respectively.The clinical pregnancy rate of donors′ IVF-ET cycles and thaw-ET cycles were 52.50% and 63.53%,respectively,the clinical the clinical pregnancy rate of recipients with POF and without POF were 62.96% and 51.59%, respectively,and there was no significant difference(P=0.099). Among the clinical outcomes, the non-POF recipients′ singletons live-birth rate was lower than that of the donors in both IVF-ET cycles and thaw-ET cycles(P<0.05).The fertilization rate,cleavage rate,embryo formation rate,high quality embryo formation rate and the embryo implantation rate per cycle had no significant difference between the eggs donors and recipients(P>0.05).Conclusion: In the donor egg IVF-ET,reducing the number of donated eggs appropriately will not influence the pregnancy outcomes of eggs donors and recipients.

doi：10.13705/j.issn.1671-6825.2016.03.031

#通信作者，女，1965年10月生，本科，教授，研究方向：辅助生殖技术与内分泌，E-mail：suyingchun1@126.com

中图分类号R711.6