李春妹

（江苏省苏州市相城区黄桥街道社区卫生服务中心检验科，江苏 苏州215132）

生化分析仪交叉污染的评价

李春妹

（江苏省苏州市相城区黄桥街道社区卫生服务中心检验科，江苏 苏州215132）

目的 探讨全自动生化分析仪操作中交叉污染问题。方法 设定生化仪的分析顺序，以三酰甘油（TG）、胆固醇（Cho）、葡萄糖（Glu）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、肌酸激酶（CK）的检测项目，观察这些试剂的检测结果与厂家提供结果进行比对。分析判断交叉污染情况。结果 实验中的任何项目之间无显著影响，仪器状态比较好时，操作过程无质量影响，可确保交叉污染较小，而当仪器状况不好时，交叉污染较严重。结论 在日常工作中，既要注意项目间的设置，以减少交叉污染，更要重视仪器的使用、维护、保养，及时发现问题、及时解决，从而从根本上保证结果的准确。

全自动生化分析仪；精密度；交叉污染；试剂

生化分析仪多采用一根针吸取试剂，在吸取不同检测项目的试剂之间仅有一个短暂的水冲洗的过程，若此过程无法达到彻底冲洗的目的，则可能会造成前后检测项目之间的交叉污染[1-5]。故笔者对我院的全自动生化仪的交叉污染率进行了实验评价。现将材料总结如下。

1 材料与方法

1.1 校准及质控品

以罗氏c.f.a.s（批号17006501）为校准血清对科华卓越400全自动生化分析仪进行定标，以罗氏公司的Pricnorm（ 批号10187470101）和Pricpath（批号10299415101）生化质控血清作为日常室内质控品。不同浓度实验标本用去离子水复溶平衡后充分混匀，分装于带盖试管内-20℃低温保存作为实验标本，每次测定时分别取出2个水平的质控品各1支置室温溶化、混匀后与患者同步检测。按试剂盒说明书设定仪器分析参数。

1.2 实验步骤

1.2.1 交叉污染实验

选择某些项目的试剂列为实验对象。其中，含磷酸盐缓冲液试剂的项目，设定生化仪的分析顺序，以三酰甘油（TG）、胆固醇（Cho）、葡萄糖（Glu）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、肌酸激酶（CK）的检测项目，观察这些试剂的检测结果与厂家提供结果进行比对。分析判断交叉污染情况。

2 结 果

本文中通过对三酰甘油（TG）、胆固醇（Cho）、葡萄糖（Glu）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、肌酸激酶（CK）、碱性磷酸酶（ALP）与厂家提供的参数比较情况；厂家提供结果（A组），本实验结果设为（B组），实验中的任何项目之间无显著影响，仪器状态比较好时，操作过程无质量影响，可确保交叉污染较小，而当仪器状况不好时，交叉污染较严重。见表1。

表1 本组试验检测的TG、Cho、Glu、ALT、CK与厂家提供的参数比较情况

3 讨 论

全自动生化分析仪中的交叉污染分为样品交叉污染和试剂交叉污染两类。样品交叉污染主要来自样品针的携带污染，在大多数全自动生化分析仪的设计中对此均通过样品针的内外冲洗技术来解决。而试剂交叉污染则是近年来引起检验人员关注的话题，因为试剂交叉污染的避免必须依赖于检验人员的正确操作。

3.1 仪器自身交叉污染的消除

交叉污染在全自动生化分析仪上出现的环节较多，但主要集中在样品加样针、试剂加样针、搅拌棒、比色杯等部件。由于为了保证加样精度，一般生化分析仪的加样针，都会在加样的时候略过量吸取样品或试剂，然后进行加样。以至于加样后加样针的内壁会残留一些样品或试剂。仪器会自动排空、加压内外冲洗。许多产品还提供样品加样针的专用清洗程序。搅拌棒也会出现交叉污染，当搅拌棒加入比色杯时，很容易把上一次搅拌的残留物带入比色杯，这样会造成比色结果不准确。可以在每次搅拌后注意观察搅拌棒是否完全清洗干净，清洗的水是否充分清洗搅拌棒的最上沿。如果没有可以调整搅拌棒的清洗高度。在每次试验检验地带网完成以后用酒精或次氯酸清洗搅拌棒，达到理想状况。涂有特富龙的搅拌棒有助于改善清洗效果。为了防止比色杯出现交叉污染，可以在每批测试结束后清洗比色杯。在每天全自动生化仪关闭之前，也应该在杯子中储满水，等第二天开机时再清洗比色杯。可以调整比色杯清洗水量使其到达比色杯的三分之二的高度，也可以把比色杯拿出用95%的酒精清洗或进行超声清洗。

3.2 试剂交叉污染的原因

由于任何自动清洗系统都有不同程度的残留，因此以下情形都有可能出现试剂交叉污染：①试剂中含有下一测试所要测定的底物；②试剂中某种成分与下一反应所要测定的底物有作用；③当前反应物对后一反应有影响。往往这些情形出现时，检验人员并没有去从试剂交叉污染的角度考虑。例如我科出现过一次胆固醇对总胆汁酸的交叉污染问题。由于总胆汁酸受外界影响挺大，所以总胆汁酸优先做。当胆固醇与总胆汁酸相隔很多项目时，测试结果有较大差异。在清洗比色杯和加样针后，单独重复做总胆汁酸结果很高。其后，单独做总胆汁酸，发现总胆汁酸数值呈正态分布，值从低到高再从高到低。考虑可能存在交叉污染现象。又采取了清洗试剂加样针后跟随做样本，随着试剂加样针清洗的次数由少到多，样本的测定值也随之下降到连续得到稳定值。在这中间又对试剂加样针的内壁清洗压力进行了相应的提高。在这次事件后通过查资料发现试剂加样针R1在加胆固醇、甘油三酯试剂R1中含有胆酸钠，造成TBA测定结果明显增高。胆固醇、载脂蛋白A、HBDH后针内含有高浓度的磷酸盐缓冲液，使磷测定结果不同程度偏高。肌酸激酶、CK-MB试剂R1含有镁，对镁测定有影响。

3.3 防止试剂交叉污染的软件设计

在现代全自动生化分析仪中可利用机内软件有效防止试剂交叉污染。①利用项目重新排序功能，避开有可能发生试剂交叉污染的项目。本方式在一般全自动生化分析仪中均提供。②对于可能发生试剂检验地带网交叉污染项目加以定义，并以清洗程序相间。所用清洗剂可预设。本方式并非在所有全自动生化分析仪中提供，请仔细阅读仪器使用说明书。

3.4 预防交叉污染的方法

①要求检验人员详细掌握仪器和试剂盒的使用方法；②在最容易出现交叉污染的环节反复分析，一个一个去排除；③合理使用仪器，定时保养维护；④对检验项目进行科学、合理的排序；⑤对排序解决不了的间隔加入数次清洗剂测试；⑥减少使用污染比较严重的试剂盒；⑦在容易出现交叉污染的环节，如样品加样针可以用次氯酸定期清洗。试剂加样针、搅拌棒、比色杯经常用酒精或次氯酸清洗。

总之。就交叉污染而言就是我们生化检验中的一项重要课题，是误差误诊非常重要的一个环节。采取有效的办法，才能确保我们所做检验项目的准确性。

[1]于 雷.生化自动 分析仪项间的 交 叉污染 及 其避 免方 法[J].临 床 检验杂志,2003,21(3):168.

[2]陈晓婷,徐俊荣,马建锋.几种试剂对镁MTB法自动分析的影响[J].临床检验杂志,2000,18(5):211-212.

[3]吴健.贵州医 药,全自动 生化分 析仪测定 顺 序 对 检 测 结 果 的 影 响[J].贵州医药,2004,28(2):124-125.

[4]丛 玉 隆.临 床实 验 分 析前 质 量 治 理 及 对 策 [J].中 华 医 学 检 验 杂志,2004,27(4):482-487.

[5]叶应妩,王毓之,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].3版.中华人民共和国卫生部医政司,2006:39-47.

R446.11

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