高效液相色谱法测定麝香接骨胶囊中伪麻黄碱和麻黄碱的含量

2013-06-28单婷婷陈玉敏水彩红

中国医药指南 2013年9期

关键词：伪麻黄碱麻黄碱三氯甲烷

单婷婷陈玉敏水彩红胡丹

（总后勤部卫生部药品仪器检验所，北京 100071）

高效液相色谱法测定麝香接骨胶囊中伪麻黄碱和麻黄碱的含量

单婷婷陈玉敏水彩红胡丹

（总后勤部卫生部药品仪器检验所，北京 100071）

目的建立高效液相色谱法测定麝香接骨胶囊中伪麻黄碱、麻黄碱的含量。方法色谱柱：SHIMADZU VP-ODS C18柱 (150mm× 4.6mm，5μm)；流动相：乙腈 -0.01mol/L 庚烷磺酸钠与 0.02mol/L 磷酸二氢钾等量混合溶液（用 10% 磷酸调节 pH 值 2.8）（19 ∶ 81）；检测波长：206nm；流速：1.0mL/min；柱温：35℃。结果盐酸伪麻黄碱在 1.51 ～ 48.4ng、盐酸麻黄碱在 16.09 ～ 515ng 线性范围内，浓度与峰面积线性关系良好。平均回收率分别为伪麻黄碱 90.98%（RSD=2.22%）、麻黄碱 95.91%（RSD=2.68%）。结论此方法简便，准确，灵敏，可用于麝香接骨胶囊中麻黄的质量控制。

麝香接骨胶囊；伪麻黄碱；麻黄碱；高效液相色谱法

麝香接骨胶囊是由赤芍、麻黄、牛膝、当归、没药、黄瓜子、血竭、朱砂、土鳖虫、续断、红花、川芎、儿茶、硼砂、马钱子、三七、骨碎补、桂枝、苏木、乳香、自然铜、人工麝香等22味药组成得中药复方制剂，收载于《部颁标准》中药成方制剂第五册。具有散瘀止痛，续筋接骨的功效，主要用于跌打损伤，筋伤骨折，瘀血凝结，闪腰岔气[1]。本品中所含的麻黄具有显著的中枢兴奋作用，为易制毒品，标准中均没有相应含量控制项目。本研究采用高效液相色谱法，成功建立了同时测定麝香接骨胶囊中伪麻黄碱和麻黄碱的含量测定方法[2-4]，从而为麝香接骨胶囊中麻黄的控制提供了可靠的方法和依据。

1 仪器与试药

SHIMADZU LC-20AT高效液相色谱仪（日本岛津公司），Mettler XS205-DU 电子天平（瑞士 Mettler公司）；乙腈、庚烷磺酸钠为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯；色谱柱：SHIMADZU VP-ODS（150mm×4.6mm，5µm）；对照品：盐酸伪麻黄碱（171237-201208）、盐酸麻黄碱（171241-201007）均购自中国药品生物制品检定所；麝香接骨胶囊（批号：20120401、20100301、20110801）由山西黄河中药有限公司提供。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：SHIMADZU VP-ODS（5µm，150×4.6mm）；流动相：乙腈-0.01mol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液（用10%磷酸调节pH值2.8）（19∶81）；检测波长：206nm；柱温：35℃；流速：1.0mL/min；进样量：5μL。理论板数按士的宁峰计算应不低于5000。

2.2 供试品溶液的制备

取本品粉末约3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加氢氧化钠试液6mL，充分振摇湿润，放置30min，加入三氯甲烷约60mL，密塞，70℃水浴回流2h，用铺有少量无水硫酸钠的滤纸滤过，再加入少量三氯甲烷荡洗容器后过滤，合并滤液蒸干，残渣加三氯甲烷-甲醇（3∶7）混合液使溶解并转移至5mL量瓶中，加混合液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.3 对照品溶液的制备

取盐酸伪麻黄碱和盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，加甲醇溶解制成每1mL各含5μg和50μg的混合溶液，即得。

2.4 方法学验证

2.4.1 专属性试验

在上述色谱条件下，精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液各5μL，进样比较上述3种溶液的HPLC图，结果表明样品中伪麻黄碱、麻黄碱与其他组分色谱峰能达到基线分离，阴性对照品中色谱峰对测定无干扰。见图1。

图1 专属性实验高效液相色谱图A.对照品溶液（1.伪麻黄碱2.麻黄碱）；B.供试品溶液；C.阴性对照品溶液

2.4.2 线性关系的考察

分别精密吸取不同浓度盐酸伪麻黄碱、盐酸麻黄碱的混合对照溶液5mL，依次注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，进样量（ng）为横坐标，绘制标准曲线，回归方程为见表1。结果表明，盐酸伪麻黄碱在1.51～48.4ng、盐酸麻黄碱在16.09～515ng范围内，峰面积与进样量有良好的线性关系。见表1。