卢彤宇

（吉林省人民医院药剂科，吉林 长春 130021）

北五味子总多糖的提取工艺研究

卢彤宇

（吉林省人民医院药剂科，吉林 长春 130021）

目的 筛选北五味子总多糖的提取工艺。方法 以水为提取溶剂，进行回流提取，采用正交实验筛选了北五味子总多糖的最佳提取工艺。结果与结论 实验结果表明北五味子总多糖的最佳提取工艺条件为：加 6 倍量水，回流提取 3 次，每次 1h。

北五味子；总多糖；提取工艺；正交实验

北五味子为木兰科植物五味子Schisandra chinensis（Turcz.）Baill Fruit）的干燥成熟果实，是常用滋补中药之一，具有收敛固涩，益气生津，补肾宁心的功效[1]。现代研究表明，北五味子含有木脂素、三萜、倍半萜、有机酸、挥发油和多糖等成分[2]。多糖在保肝、抗疲劳、免疫促进、抗衰老及抗氧化、抗肿瘤[2]等方面具有良好的生物活性。本文采用正交实验优选北五味子总多糖的的最佳提取工艺，对北五味子多糖的进一步开发将大有裨益。

1 仪器与材料

1.1 仪器

DU800紫外可见分光光度计（美国Beckman Coulter公司）；BS124S电子天平（德国Sartorius公司）；79-2型磁力搅拌器（上海比郎仪器有限公司）；数显恒温水浴锅（上海浦东物理光学仪器厂）。

1.2 试剂与材料

北五味子（购于长春同仁堂药店）；95%乙醇；无水乙醇；无水葡萄糖；浓硫酸；苯酚均为分析纯（北京化工厂）。

2 方法与结果

2.1 多糖的含量测定方法

2.1.1 标准溶液配制

葡萄糖标准溶液的配制：精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖9.7mg，于100mL容量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度，即得葡萄糖标准溶液。5%的苯酚溶液的配制：量取蒸馏后的苯酚溶液5mL，于100mL棕色容量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度，即得。

2.1.2 标准曲线制备

精密量取葡萄糖标准溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mL分别加入试管中，加蒸馏水补足至1.0mL，再分别加入5%苯酚溶液1.0mL，然后迅速滴加浓硫酸溶液2.5mL，振摇，放置使其充分反应，另以蒸馏水1.0mL，同法操作为空白，于紫外可见分光光度计上，在490nm处测定其吸光度。以A对葡萄糖浓度C做回归，得方程：A=6.8688C+0.02231，r=0.9994。葡萄糖溶液浓度在0.0194～0.097mg/ mL范围内，与吸光度呈线性关系。

2.1.3 供试品溶液的制备

精密量取提取溶液1mL加无水乙醇至含醇量80%，摇匀，5000r/ min离心30min，倾出上清液，沉淀用乙醇洗涤2次，挥去乙醇，残渣用蒸馏水溶解并定容，摇匀，即得。

2.1.4 样品含量测定

吸取样品上清液1mL按照标准曲线的方法测定吸光度的值，在标准曲线上读出对应的浓度值，即得。

2.2 北五味子提取多糖时药材预处理

根据文献报导，北五味子药材中含有大量的脂溶性成分，如木质素、三萜、挥发油等，为避免脂溶性成分对多糖提取产生影响，我们考察了先用乙醇脱脂再用热水回流提取和直接用热水回流提取进行对比，具体操作如下：称取北五味子药材粗粉5g，2份，一份加入95ā乙醇30mL，回流提取1h，滤过，弃去滤液，药渣挥去醇味，加入30mL水回流提取1h，滤过，收集滤液；另一份直接加入30mL水回流1h，滤过，收集滤液。按照总多糖的含量测定方法测定中多糖的含量，结果见表1。

表1 北五味子中总多糖提选取溶剂筛

试验结果表明：直接采用水回流提取的总多糖大于先脱脂再用水回流提取的。因此采用直接用水回流提取。

2.3 正交实验筛选北五味子总多糖提取工艺

经预试，影响北五味子总多糖提取的因素主要有A：提取溶剂；B：提取时间；C：提取次数三个因素，每个因素考察3个水平，因素水平见表2。

表2 正交实验因素水平表

表3 正交实验表

表4 方差分析表

根据以上因素水平，按照L9（3）4正交表进行试验，称取北五味子粗粉9份，每份10g，按照表2条件进行试验，采用热水回流提取，滤过，合并滤液，按照总多糖的含量测定方法测定总多糖的含量，实验结果及方差分析见表3，表4。

由方差分析结果可知，A、B二个因素对北五味子总多糖的提取没有显著影响，而C因素有显著影响，因此确定北五味子总多糖的提取工艺为A1B1C3，即：加6倍量水，回流提取3次，每次1h。

3 讨 论

3.1 多糖的含量测定方法选择，对于多糖含量测定一般采用比色法进行含量测定，本文中采用葡萄糖为对照品。用苯酚-硫酸为显色剂，在490nm处用紫外可见分光光度计测定吸收度，计算含量，该方法是测定多糖的常用方法。

3.2 北五味子中含有大量脂溶性成分，为防止其对多糖提取产生干扰，考察了先脱脂再回流提取和直接回流提取两种方法对其进行考察，结果发现先脱脂再进行回流提取并不能提高北五味子总多糖的提取率，因此选用直接回流提取的方法提取，并通过正交实验筛选其总多糖的最佳提取工艺。北五味子总多糖的最佳提取工艺为：加6倍量水，回流提取3次，每次1h。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典2005年版一部[M].北京:化学工业出版社,2005:44.

[2]李 晓 光 ,高 勤,翁 文 ,等.五 味 子 多 糖 的 研 究 概 况 [J].时 珍 国 医 国药,2006,17(6):931.

R282.710.3

：B

：1671-8194（2013）09-0090-02