孙亚茹, 王建科, 蔡吉松, 彭安权, 钱 娟, 周 容, 姚 斌, 沈 军, 陈 汉, 孟祥书

(1. 余庆县农业农村局,贵州 余庆 564400;2. 河北农业大学,河北 保定 071000;3. 遵义盛祥农业发展有限公司,贵州 余庆 564400;4. 余庆县益宠康动物诊所,贵州 余庆 564400)

犬细小病毒病是由犬细小病毒(Canineparvovirus,CPV)引起的急性、高度接触性传染病[1]。该病可导致严重的出血性胃肠炎或心肌炎,并伴有淋巴细胞减少症,多发于2～6月龄幼犬和未接种疫苗的犬,纯种犬易感性较高[2～4]。自20世纪70年代首次发现CPV-2型以来,已出现3种变异株(CPV-2a、CPV-2b、CPV-2c)[5]。目前部分商品疫苗使用CPV-2b毒株,部分疫苗仍然使用原始的CPV-2毒株,导致免疫效果欠佳或免疫失败[6],因此快速诊断和治疗该病在临床上具有重要意义。现将3例犬细小病毒病的临床诊治情况介绍如下,供同行参考。

1 病例情况

病例1:2023年3月3日接诊,金毛犬、雌性、3月龄、体重3 kg,3月1日发生呕吐、精神不振,3日腹泻严重且有腥臭味,体温38.5 ℃,鼻镜干燥。病例2:2023年 4月7日接诊,杂交泰迪犬、雄性、6月龄、8 kg,呕吐1天,体温38.9 ℃,精神不振,鼻镜干燥,排酱样稀便并有恶臭味。病例3:2023年4月9日接诊,德国牧羊犬、雄性、4月龄、体重13 kg,呕吐1天,体温37.5 ℃,排血水样粪便并有恶臭味。根据病犬的临床症状,疑似犬细小病毒感染。

2 实验室检查

2.1 CPV试条管检查

用棉签采集犬的新鲜粪便,使用上海快灵生物工程有限公司生产的犬细小病毒抗原检测封闭免疫试条管(胶体金法),按说明书方法进行检测(检测线T和质控线C均出现1条红色条带,无论颜色深浅均判为阳性;仅质控线C出现1条红色条带,检测线T不出现红色条带,判为阴性;质控线C未出现红色条带,无论检测线T是否出现红色条带,均判为无效),结果3例病犬均为CPV阳性(见图1)。

病例1 病例2 病例3图1 CPV试条管检测结果

2.2 血常规检查

采集病例2、病例3血液(病例1因犬主拒绝未检查),用迈瑞BC-2800型动物血液细胞分析仪进行血常规检查。由表1可见:病例2红细胞数、血红蛋白、红细胞压积升高,说明病犬有脱水现象;其他指标正常,无继发细菌感染。病例3红细胞数、血红蛋白、红细胞压积升高,说明病犬有脱水现象;淋巴细胞数、淋巴细胞百分比升高,中性粒细胞数、中性粒细胞百分比降低,感染情况较重。

表1 病犬血常规检查结果

2.3 CPV核酸PCR检测

分别采集3只病犬的新鲜粪便或肛门拭子,使用TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0试剂盒[宝生物工程(大连)有限公司]提取DNA,参照文献报道引物(P1-AGAATGATAGGCGG TTTGTGTGT,F1-CTTTGTTTCCTGTGCTGTCGT)[7],按2×M5TaqHiFi PCR Mix(北京聚合中美生物科技有限公司,型号:MF002-10)说明书方法,使用TGreat Expert梯度PCR仪(TIANGEN公司,型号:OSE-GP-03)进行PCR扩增。扩增产物使用电泳仪(北京东方瑞利科技有限公司,型号:DYY-300C)经2%琼脂糖凝胶电泳。结果:3份样品均扩增出973 bp目的条带(见图2),判定3例病犬均存在CPV感染。

M:DL 2 000 DNA Marker;1:阳性对照;2:阴性对照;3:病例1肛门拭子;4:病例2粪便;5:病例3粪便

3 诊断

根据病犬临床症状及实验室检查结果,确诊3例病犬均为犬细小病毒病。

4 治疗

4.1 特异性治疗

0.9%氯化钠10 mL+犬细小病毒单克隆抗体0.5 mL/kg,静脉注射,1次/天,连用1周;0.9%氯化钠10 mL+犬细小病毒高免血清0.5 mL/kg,静脉注射,1次/天,连用1周;0.9%氯化钠10 mL+白蛋白0.5 mL/kg,静脉注射,1次/天,连用1周。

4.2 对症治疗控制继发感染

5%糖盐水50 mL+氨苄西林钠50 mg/kg,静脉注射,1次/天,连用1周;5%糖盐水50 mL+维生素C 60 mg/kg+维生素B 30 mg/kg+止血敏0.1 mL/kg+庆大霉素2万IU/kg,静脉注射,1次/天,连用1周(症状好转后药量减半);5%糖盐水5 mL+恩诺沙星0.5 mL/kg,肌肉注射,1次/天,连用1周;0.9%氯化钠100 mL+50%葡萄糖注射液50 mL,静脉注射,1次/天,连用1周。

4.3 辅助治疗

干扰素20万U/kg、抑菌蛋白0.1 mL/kg、氢溴酸东莨菪碱1 mL,分别肌肉注射,1次/天,症状好转停止用药。

经上述方法治疗1周后,3只病犬临床症状完全消失,精神状态良好,饮食恢复正常。

5 讨论

5.1犬细小病毒病临床多发,潜伏期为3～7天,发病急,病程短,不及时治疗易导致死亡[8]。治疗时多采用综合疗法,包括补液、止吐、控制继发感染、抗病毒及其他辅助治疗和饮食管理[9]。在治疗过程中可能出现病情加重的情况,应注意与肠套叠、其他病毒感染等区别。此外,该病毒对肠腺隐窝的破坏可引起绒毛萎缩、腹泻、呕吐、肠出血、继发细菌感染[3],应注意止血、止吐、平衡酸碱、补充电解质和体液,并进行抗病毒和抗菌治疗。本次治疗的3例病犬临床表现均为肠炎型,出现呕吐、腹泻后立即就医,病例1、3治疗3～5天临床症状基本稳定,但病例2在治疗第2、3天时病情加重,通过继续采用特异性治疗+对症治疗+辅助治疗的综合治疗方法,1周后康复。

5.2犬细小病毒病临床上有52%的病例表现为心肌炎型[10],对于心肌炎型病例的治疗方法探究也需要加以考虑。据文献报道,心肌炎型多见于4～6周龄幼犬,未出现临床症状就突然死亡,或出现严重呼吸困难后死亡[11],而大部分幼犬因母源抗体的保护,不易出现急性心肌炎症状[5]。

5.3对于犬细小病毒病的预防,一要加强消毒:CPV对普通消毒剂有较强的抵抗力,但对紫外线、福尔马林、次氯酸钠、氧化剂比较敏感,要定期对犬舍、饲养用具、周围环境使用不同消毒液进行交替消毒。二要加强营养,提高免疫力:合理搭配犬饲粮,保证营养全面,适当补充维生素,提高机体免疫力,减少疾病发生。三要及时免疫:注射CPV疫苗是预防该病的重要方法。目前,市场上多用国产犬五联疫苗或者进口犬四联、八联疫苗进行免疫。此外建议使用WSAVA(世界小动物兽医协会)推荐的犬核心疫苗(犬细小病毒、犬瘟热、犬腺病毒),可有效预防个体感染,确保群体免疫[4]。根据宠物疫苗接种国际指南,使用改良减毒活疫苗给成年犬接种频率不超过3年[12～14]。