张文娟,戴婷丽,李 沛

青海省人民医院:1.健康管理部;2.病理科;3.神经内科,青海西宁 810000

阿尔茨海默病(AD)是一种慢性进行性神经系统退行性疾病,其发病机制复杂,与β淀粉样蛋白(Aβ)沉积、tau蛋白神经纤维缠结、神经元丢失、神经炎症、氧化应激等密切相关,AD患者脑中神经元丢失的机制可能是凋亡引起的;目前药物治疗只能改善一些症状,还有部分患者治疗不佳[1-3]。研究表明长链非编码RNA(lncRNA)参与了AD相关的病理生理学进展,确定lncRNA相关的竞争性内源RNA网络可以有助于AD诊断和未来治疗策略[4]。小核仁RNA宿主基因15(SNHG15)是一种lncRNA,研究报道lncRNA SNHG15可通过调节微小RNA(miR)-455-3p/肿瘤蛋白P53诱导性核蛋白1轴促进氧-葡萄糖剥夺/复氧诱导的神经元凋亡、炎症和氧化损伤[5]。抑制lncRNA SNHG15通过靶向miR-183-5p/叉头转录因子1轴防止脑缺血再灌注损伤[6]。StarBase在线分析软件预测发现lncRNA SNHG15与miR-942-5p有结合位点。研究报道miR-942-5p在氧化低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞中表达下调,circ_0003204通过调节miR-942-5p/组蛋白去乙酰化酶9调控氧化低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞中的细胞生长、氧化应激和炎症[7]。但尚未有报道明确lncRNA SNHG15和miR-942-5p在AD中的功能和调节机制。因此,本实验旨在探讨miR-942-5p参与的AD细胞模型中,lncRNA SNHG15对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导的PC12细胞氧化应激和凋亡的机制。

1 材料与方法

1.1材料 源自大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤的PC12细胞购自美国ATCC公司,DMEM培养基、Aβ25-35购自美国Sigma公司,lncRNA SNHG15小干扰RNA(si-SNHG15)、miR-942-5p模拟物(miR-942-5p)、miR-942-5p抑制剂(anti-miR-942-5p)及相应的阴性对照si-NC、miR-NC、anti-miR-NC购自上海生工生物公司,Trizol试剂、荧光定量试剂盒、逆转录试剂盒购自日本Takara公司,miRNA提取试剂……