吴双俊,赵亭,刘长江,尹彩霞

(山东方明药业集团股份有限公司,山东 东明 274500)

吡拉西坦注射液,英文名为:Piracetam Injection,其主要成分为吡拉西坦,吡拉西坦的别名有:吡乙酰胺、酰胺吡酮、酰胺吡、咯烷酮、吡烷酮醋胺、脑复康、乙酰胺吡咯烷酮。吡拉西坦的分子式为C6H10N2O2,相对分子质量为142.16,其化学名为2-氧代-1-吡咯烷基乙酰胺,为白色或类白色的结晶性粉末;无臭,味苦,在水中易溶,在乙醇中略溶,在乙醚中几乎不溶。吡拉西坦注射液适用于急、慢性脑血管病、脑外伤、各种中毒性脑病等多种原因所致的记忆减退症状及轻、中度脑功能障碍。也用于儿童智力发育迟缓等的功效。吡拉西坦注射液肌肉注射、静脉注射、静脉滴注均可,肌肉注射。每次1 g,一日2～3次。静脉注射。每次4～6 g,一日2次。静脉滴注。每次4～8 g,一日1次,用5%或10%葡萄糖注射液或氯化钠注射液稀释至250 mL后使用。

吡拉西坦注射液是国家医保目录乙类药物,用药方便、疗效确切,临床应用广泛。吡拉西坦注射液参比制剂持证商为UCB Pharma,上市国家为土耳其。国内吡拉西坦注射液收载于中华人民共和国药典2020年版二部578页,有5 mL∶1 g,20 mL∶4 g,20 mL∶8 g等3个药品规格,有效期为两年。国内生产企业众多,山东方明药业集团股份有限公司是其中的一家。方明药业是吡拉西坦注射液上市较早、销售范围较广的生产企业,积累了丰富的生产经验。

为提升吡拉西坦注射液质量水平,根据国家质量和疗效一致性评价要求,参照参比制剂进行研究。参照参比制剂制定处方,同时制备过程中严格控制制备工艺参数,通过控制这些参数,确保在得到质量安全、有效、稳定、均一的产品的同时,在生产、使用和储存过程中采用适当的方法,保证临床用药安全。

参照参比制剂研究吡拉西坦注射液的处方及制备工艺,对提升我国在该产品生产过程中的质量控制水平,对维护百姓用药安全及响应国家生物安全号召方面有较强的现实意义。

1 试验用药与仪器设备

1.1 试验用药

吡拉西坦(东北制药集团股份有限公司);醋酸钠(成都华邑药用辅料制造有限责任公司);冰醋酸(成都华邑药用辅料制造有限责任公司);活性炭(注射用)(上海活性炭厂);注射用水(山东方明药业集团股份有限公司)。

1.2 仪器设备

KCQ80安瓿超声波清洗机(上海远东机械设备总厂);JXSBSY251高效液相色谱仪(Agilent Technologies1260);JXSBSY62电子分析天平(赛多利斯科学仪器(北京)有限公司);JXSBBG68循环水式多用真空泵(河南省予华仪器有限公司);JXSBSY15电热恒温培养箱(山东潍坊精鹰医疗器械有限公司);ASM4.0安瓿水浴灭菌器(山东新华医疗器械股份有限公司);AGFS-8/1-20安瓿灌装封口机(上海远东机械设备总厂);Five Easy Plus pH计(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司);酒精喷灯、不锈钢桶、水环真空泵、镊子等。

2 方法与结果

2.1 吡拉西坦注射液处方及制备工艺

参考吡拉西坦注射液原研产品处方:吡拉西坦为活性成分,醋酸钠和冰醋酸为pH值调节剂和缓冲剂。为吸附杂质、脱色和除热源加入适量的活性炭(供注射用),注射用水为溶剂。依照本品进口注册标准及相关参考文献,结合原辅料的性质初步拟定如下处方及制备工艺。

2.1.1 处方

处方包含:吡拉西坦、醋酸钠、冰醋酸、活性炭(供注射用)、注射用水。

2.1.2 制备工艺

取处方量约70%的注射用水,加入冰醋酸、醋酸钠,搅拌溶解,再加入吡拉西坦搅拌溶解,再加入活性炭(供注射用),搅拌吸附15 min,过滤、脱碳,检测pH值应合格,否则用冰醋酸或10%醋酸钠溶液调节pH值至合格,再补加注射用水至全量,搅拌均匀,灌装,熔封(充氮气),灭菌即得。

2.2 吡拉西坦注射液工艺的筛选

2.2.1 配制过程中注射用水初始水量和加料顺序的选择

根据工艺变更风险评估依据,50%的初始水量能够保证各物料的充分溶解,且对含量、有关物质、无菌和pH值的影响很小,故在初步确定制备工艺中确定的配制过程中初始水量控制在50%～60%是合适的,在此基础上进行了投料顺序的选择,详见表1、2。

表1 投料顺序

表2 投料顺序对制剂质量影响的检测结果

结果显示,投料顺序对制剂的质量无明显影响。过滤前后制剂的性状、pH值、含量和有关物质无明显区别,根据实际生产要求,初步确定的投料顺序选择:吡拉西坦、醋酸钠、冰醋酸是合适的。

2.2.2 是否充氮及配液温度的选择

配制两组样品,分别考察配制、灌装过程是否充氮(控制残氧量<3.0%)及配制温度对产品质量的影响。试验结果如表3所示。

表3 充氮工艺考察试验结果

结果显示,是否充氮对产品质量无影响,配液温度在25～60 ℃范围内对产品质量无影响,根据生产实际情况,产品配液温度可严控至25～60 ℃。

2.2.3 活性炭(供注射用)浓度的选择

按2.1配制2 000支样品,按活性炭(供注射用)常用质量浓度0.10,0.05 g/mL配制注射液,考察活性炭(供注射用)对注射液性状、pH值、含量的影响,以筛选活性炭(供注射用)的最佳用量,如表4所示。

表4 活性炭(供注射用)吸附试验结果

由表4结果可知,0.10,0.05 g/mL的活性炭(供注射用)均可使注射液成为无色澄明液体,并且对性状、pH值、含量无明显影响,为保证产品质量,在工艺中选用0.10 g/mL的活性炭(供注射用)。

2.2.4 注射液pH值的选择

按2.1配制注射液,用醋酸钠溶液或冰醋酸调节pH值至4.9,5.4,5.9,分别灌入20 mL安瓿瓶中,熔封,灭菌,冷却,观察样品性状,测定其pH值、含量、有关物质。如表5所示。

表5 pH值对样品的影响

由表5结果可知,本品在不同的pH值调整点,灭菌后产品的性状、含量、有关物质均无明显变化。因测得原研上市产品的pH值为5.6,为保证产品质量,把本品pH值控制在5.4～5.9。

2.2.5 灭菌参数的筛选

按2.1配制1 000支样品,用4%的氢氧化钠溶液调节pH值至5.6,灌装于5 mL安瓿瓶中,分别选择三种灭菌条件(121 ℃,12 min;121 ℃,15 min;115 ℃,30 min)进行考查。从性状、有关物质、含量、无菌几个方面进行检测。对比不同灭菌参数对产品质量的影响,确定本品的灭菌参数,结果如表6所示。

表6 灭菌参数考察试验结果

结果显示,121 ℃,15 min参数下有关物质水平最高但仍低于参比制剂,根据相关法规要求,确定本品灭菌参数为121 ℃,15 min。

根据以上筛选研究确定的处方及制备工艺为:取处方量约70%的注射用水(25～60 ℃),加入冰醋酸、醋酸钠,搅拌溶解,再加入吡拉西坦搅拌溶解,再加入0.10 g/mL活性炭(供注射用),搅拌吸附15 min,过滤、脱碳,检测pH值至5.4～5.9,否则用冰醋酸或10%醋酸钠溶液调节pH值至合格,再补加注射用水至全量,搅拌均匀,灌装,熔封(充氮气),121 ℃、灭菌15 min。

2.2.6 处方工艺确认和重现

2.2.6.1 确定的小试处方工艺及重现性

1)小试批处方组成见表7。

表7 小试批处方组成

2)小试批制备工艺:向配制容器中加入约10 000 mL的注射用水(25～60 ℃);加入处方量的吡拉西坦、醋酸钠和冰醋酸。加入活性炭(供注射用)吸附15 min,过滤,取样检测合格后,将药液灌装于20 mL硼硅安瓿瓶中(棕色),灌装前后均充入氮气,熔封。121 ℃,15 min灭菌。

3)小试三批考察结果见表8。

表8 小试三批考察结果

结果显示,小试3批高温60 d各项考察指标均符合规定,且与参比制剂无差异,故可以进行下一步的中试放大。

2.2.6.2 中试放大三批

1)处方及批量。批处方:吡拉西坦、醋酸钠、冰醋酸、活性炭(供注射用)、注射用水。

2)中试放大批制备工艺:向配制罐中加入注射用水(25～60 ℃)至50%～60%处方量;加入处方量的吡拉西坦、醋酸钠和冰醋酸;搅拌至完全溶解后加注射用水定容至全量并搅拌均匀。加入活性炭(供注射用)吸附15 min,过滤,取样检测合格后,灌装(前后均充入氮气),熔封。121 ℃,15 min灭菌。

3)实验室放大样品质量研究,中试放大研究样品检验结果见表9。

表9 中试放大样品检测结果

结果显示,中试放大产品的关键质量特性与参比制剂无显著差异,中试放大工艺可行,经中试放大三批试验确定的处方工艺能满足工业化生产需要。

2.2.6.3 通过研究确定的处方及工艺

1)处方组成见表10。

表10 处方组成

2)包装材料:本品直接接触药液的包材为中硼硅玻璃安瓿瓶(棕色)。

3)制备工艺:向配制罐中加入注射用水(25～60 ℃)至50%～60%处方量,加入处方量的吡拉西坦、醋酸钠和冰醋酸;搅拌至完全溶解后加注射用水定容至全量并搅拌均匀。加入活性炭(供注射用)吸附15 min,过滤,取样检测合格后,灌装(充氮气),熔封。121 ℃,15 min灭菌。

3 结论

通过对参比制剂进行解析,研究了吡拉西坦注射液的处方和制备工艺,确定了吡拉西坦注射液最佳处方及制备工艺,并对其稳定性进行了考察。结果表明,所研制的产品处方及制备工艺合理,质量稳定,适合吡拉西坦注射液工业化生产。