张晓倩，王鹏皓，郭磊

（中国医科大学附属第一医院骨科，沈阳 110001）

假体周围骨溶解（periprosthetic osteolysis，PPOL）是影响人工假体寿命的主要限制因素之一。研究［1］发现，全髋人工关节置换术后约5.5%的患者和3.1%的全膝人工关节置换术患者接受了PPOL导致的翻修手术。人工关节的翻修手术具有巨大的挑战性，可能伴随严重的并发症［2］。最近的研究［3］表明，假体-骨界面产生的磨损颗粒诱发慢性炎症并破坏骨稳态，诱发PPOL，进而导致假体无菌性松动，因此，防止PPOL的关键在于抑制磨损微粒诱导的骨溶解反应。研究［4］显示，微RNA（microRNA，miRNA）参与的基因调控对靶基因的表达可产生广泛影响。miR-217在肾小球系膜细胞、乳腺癌上皮细胞和肝癌细胞中发挥多种生物学功能［5］。本研究拟构建小鼠胫骨PPOL模型，探讨miR-217在钛微粒诱导骨溶解中的作用机制，以期为PPOL的防治提供新靶点和组织工程化相关数据。

1 材料与方法

1.1 实验动物、试剂及仪器

12周龄成年雄性C57BL/6小鼠（购自中国医科大学实验动物中心）40只，体质量（25±2）g。兔抗鼠矮小相关转录因子2（runt-related transcription factor 2，Runx2）抗体、抗骨桥蛋白（osteopontin，OPN）抗体（美国 Sigma公司），GAPDH抗体（北京中杉金桥生物有限公司），miR-217 mimics（上海吉凯基因医学科技股份有限公司），TRIzol试剂（美国Thermofisher公司），ABIPrism7500序列检测系统（美国Beyotime公司）。

1.2 磨损颗粒制备

100%无水乙醇浸泡去内毒素处理后钛颗粒，离心，紫外线下照射24 h，浸泡于无菌 PBS，4 ℃放置待用。

1.3 动物模型建立

采用针植入加钛颗粒手术方法建立小鼠胫骨PPOL动物模型。10%水合氯醛腹腔注射（30 mg/kg）麻醉小鼠，选择右膝关节髌骨旁内侧切口，长度5 mm，暴露胫骨平台，0.8 mm牙钻钻孔至胫骨骨髓腔，孔直径1 mm，深5 mm。……