郭骏戈，董玉琳，曹向红，高 辉，王胜虎，许丽虹，王 萍

(昆明市延安医院，云南 昆明 650051)

系统性红斑狼疮属于自身免疫性疾病的一种，常可造成多系统损害，最常累及的器官为肾脏及皮肤，且常易同其他类型的结缔组织疾病重叠或并发恶性肿瘤[1]。目前对于该疾病的病因、机制尚不明确，但大部分学者认为该疾病的发病与遗传、内分泌、感染、免疫异常等因素有关，是在多种因素的作用下，造成的T淋巴细胞数量及功能降低，引起B细胞的增生，从而使机体产生大量的自身抗体，与抗原结合沉积于皮肤、关节、小血管、肾小球等部位，继而导致的一系列临床症状[2，3]。但由于系统性红斑狼疮的特异性缺乏，因此，临床早发现、早诊断较为困难[4]。近年来，有研究显示抗核糖体P蛋白抗体(anti-ribosomal phosphoportein antibodies，ARPA)、抗中性粒细胞胞浆抗体(antineut rophil cytoplasmic antibodies，ANCA)与自身免疫性疾病有关[5，6]。本研究就ARPA、ANCA在系统性红斑狼疮患者中的表达及临床意义进行研究，旨在为临床工作提供参考新思路，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2018年1月至2021年12月我院收治的系统性红斑狼疮患者126例作为研究组，纳入标准：①符合系统性红斑狼疮临床相关诊断标准[8]；②所有患者的临床资料均完整；③所有患者及家属均知晓本研究并签署知情同意书。排除标准：①存在其他免疫系统疾病者；②已使用糖皮质激素或免疫抑制剂治疗者；③药物依赖史者。126例患者中男24例，女102例；年龄30～60岁[(42.08±7.92)岁]；通过系统性红斑狼疮疾病活动指数(systemiclupus erythematosus disease activity index，SLEDAI)标准对患者是否处于活动期进行评估[7]，其中活动期40例(SLEDAI>9)，非活动期86例(SLEDAI≤9)。另选取同时间段健康体检人群82例作为对照组，其中男20例，女62例，年龄29～58岁[(41.73±8.25)岁]。两组年龄、性别等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经医院伦理委员会批准。

1.2 方法抽取所有受检者空腹肘静脉血5 ml，离心(3500 r/min，5 min，r=8 cm)后取分离血清，ARPA、ANCA采用INOVA Diagnostics,Inc.依诺瓦诊断公司抗中性粒细胞胞浆抗体(间接免疫荧光法)与欧蒙医学实验诊断股份公司印迹法自动操作仪进行检测采用间接荧光免疫法(indirect immuno fluorescence，IIF)检测所有研究对象的血清ARPA、ANCA，采用滴定平板TM技术和生物薄片马赛克技术进行检测；加做系统性红斑狼疮阴性对照、胞浆型抗中性粒细胞胞质抗体(c-ARPA、c-ANCA)阳性对照和核周型抗中性粒细胞胞质抗体(c-ARPA、p-ANCA)阳性对照。检测结果诊断：根据乙醇固定的中性粒细胞基质片，可区分两种不同抗体的荧光模型。c-ARPA、c-ANCA显示均匀分布的颗粒型荧光，其中胞核无荧光。c-ARPA、p-ANCA显示带状荧光。而阴性无特殊荧光模型显示。

1.3 观察指标①比较研究组与健康组ARPA、ANCA的表达。②比较活动期与非活动期期患者ARPA、ANCA的表达。③统计系统性红斑狼疮患者肾损害的发生情况，肾损害的评定标准，满足以下一项即可：出现血尿或蛋白尿，尿蛋白定量(24 h)超过0.5 g，或定性呈(+ + +)及以上，尿镜检可见每高倍镜视野下红细胞数超过5 个或者存在细胞管型；经肾活检确认。分析影响患者肾损害发生的危险因素。

1.4 统计学方法应用SPSS 22.0统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差表示，比较采用t检验或方差检验；计数资料以例(百分比)的形式表示，比较采用χ2检验；多元Logistic回归分析影响系统性红斑狼疮患者肾损害发生的危险因素。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 研究组与对照组ARPA、ANCA表达比较研究组ARPA、ANCA阳性表达率均高于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 研究组与对照组ARPA、ANCA表达比较 (n)。见表1.

2.2 活动期与非活动期期患者ARPA、ANCA表达的比较活动组ARPA、ANCA阳性表达率高于非活动组(P<0.05)。见表2 。

表2 活动期与非活动期期患者ARPA、ANCA表达的比较 (n)

2.3 肾损害组与非肾损害组患者临床资料比较126例系统性红斑狼疮患者中发生肾损害67例，发生率为53.17%。肾损害患者中疾病活动期占比、抗dsDNA抗体阳性占比、ARPA及ANCA表达水平与非肾损害患者比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 肾损害组与非肾损害组患者临床资料比较 [n(%)]

2.4 系统性红斑狼疮患者肾损害发生的影响因素分析疾病活动期、抗dsDNA抗体阳性、ARPA阳性、ANCA阳性为影响系统性红斑狼疮患者肾损害发生的独立危险因素(P<0.05)，见表4。

表4 系统性红斑狼疮患者肾损害发生的影响因素分析

3 讨论

系统性红斑狼疮是一种以多系统损害且伴有多种自身抗体为特征的免疫性疾病，临床表现复杂，病情迁延，难以治愈，部分系统性红斑狼疮患者可自行缓解，或呈“一过性”发作后，病症经数月可完全消失[9，10]。大多数患者可出现不同程度的皮肤和黏膜损害，骨骼、心脏、呼吸系统、肾脏、神经系统、血液系统等受累，严重者可致充血性心力衰竭、肺栓塞等[11]。本病病因至今尚未肯定，考虑与遗传、免疫异常、性激素、环境等均有一定的关系[12]。多种因素相互作用可致使系统性红斑狼疮患者体内T淋巴细胞减少、降低T抑制细胞功能，大量的自身抗体产生，与相应抗原结合后形成免疫复合物，在皮肤、关节、小血管、肾小球等部位沉积而产生各种病理现象[13，14]。

既往研究指出，系统性红斑狼疮患者血清中有免疫特异性抗细胞浆抗体的存在，其靶抗原主要为核糖体60S亚基中的P0、P1以及P2三种磷蛋白[15]。临床将这些磷蛋白抗体命名为ARPA，当血清中的ARPA为阳性表达时，可阻断延长因子EF-α及EF-2与核糖体之间的相互作用[16]。且有研究往培养的人细胞株中注射微量的ARPA后发现，其能对蛋白的合成造成抑制，并说明磷蛋白上的抗体所识别的决定簇同ARPA结合后能对蛋白合成发挥抑制作用[17]。本研究通过对比健康人群与系统性红斑狼疮患者的ARPA水平发现，研究组ARPA阳性表达率高于对照组。尽管ARPA在系统性红斑狼疮患者血清中阳性表达率不如其他系统性红斑狼疮的标志性抗体高，但由于ARPA对系统性红斑狼疮的有着较高的特异性，因此检测 ARPA对判断系统性红斑狼疮仍具有可行性。且活动组ARPA阳性表达率高于非活动组，证实ARPA参与了系统性红斑狼疮的发生、发展过程。

ANCA为针对单核与中性粒细胞胞浆的一种成分：为溶菌酶、蛋白酶3、乳铁蛋白、髓过氧化物酶、通透性杀菌蛋白以及人白细胞弹性蛋白酶组织蛋白酶等自身抗体的总称[18]。研究指出，ANCA对于诊断原发性小血管炎有着一定的应用价值，先已被广泛用在多种血管炎的诊断中，而原发性血管炎为系统性红斑狼疮的病理特征之一，故推测ANCA可用于系统性红斑狼疮的判断[19]。本研究中，与正常健康人群相比，系统性红斑狼疮患者的ANCA阳性表达率明显更高。且活动组ANCA阳性表达率高于非活动组，这可能是由于ANCA扩大并维持了白细胞的局部吸引和通过激活中性粒细胞导致中性粒细胞脱颗粒、出现反应性氧分子、释放蛋白溶解酶等过程，使局部血管受到损害。故推测ANCA可能参与了系统性红斑狼疮的发生、发展过程。研究指出，肾脏是系统性红斑狼疮的主要靶器官，而肾损害是其常见的并发症[20]。本研究发现，疾病活动期、抗dsDNA抗体、ARPA、ANCA皆为影响系统性红斑狼疮患者肾损害发生的独立危险因素，但具体效应还待予以进一步研究证实。而通过对ARPA、ANCA进行监测可有效降低系统性红斑狼疮患者肾损害的发生风险，为临床尽早实施针对性治疗提供帮助，以阻碍患者病情进展，从而有利于患者预后的改善。但由于本研究样本含量较小，研究时间较短，针对狼疮肾损害相关的ANCA的亚型，如MPO、PR3等的分析缺乏一定的随访数据，故后续可加大样本含量，延长研究时间，进一步针对狼疮肾损害相关的ANCA的亚型分析进行更深入的前瞻性研究，为临床诊治提供更好的参考依据。

综上，ARPA、ANCA在系统性红斑狼疮患者中呈阳性表达，是影响系统性红斑狼疮肾损害发生的危险因素，提示ARPA、ANCA可能参患者病情发生、进展，临床需重视检测该两指标，为制定诊疗工作提供参考资料。