龚 丽，米紫玥，孔玉洁，徐海霞，田 力，刘 忠

作者单位：1安徽医科大学公共卫生学院，合肥 2300322中国医学科学院/北京协和医学院输血研究所，成都 6100523中国医学科学院输血不良反应研究重点实验室，成都 610052

血小板在保存期间可发生储存损伤(platelet storage lesion，PSL)[1]，分泌细胞外囊泡(extracellular vesicles，EVs)。EVs数量随血小板保存时间延长而增加[2]。EVs已被证明具有促凝和促炎活性[3]，参与类风湿性关节炎和动脉粥样硬化等血栓并发症[4]。血小板EVs主要包括两类：外泌体、微囊泡[5]。外泌体、微囊泡均为双层膜结构，粒径大小分别为30 ～ 150 nm，100 ～ 1 000 nm[6]。外泌体携带有丰富的蛋白质等生物活性物质[7]。近年来，研究者们关注于外泌体在各种生理病理状态下生物活性物质的变化及可能的影响机制，而对于随着血小板保存时间延长，外泌体浓度变化及其对凝血功能的影响的研究较少，血小板保存期间产生的外泌体是否参与EVs的促凝作用有待研究。因此，该研究着重探讨手工血小板中外泌体浓度与保存时间的关系，并在此基础上探究其对凝血功能的影响。

1 材料与方法

1.1 材料手工血小板，来自四川省德阳市中心血站。

1.2 仪器与试剂超速离心机(Beckman Coulter，美国贝克曼库尔特公司)；纳米流式分析仪(福流，成都智予医学检验有限公司)；透射电子显微镜(FEI TecnaiTMG 2 Spirit，捷克FEI公司)；化学发光凝胶成像系统(CLINX ChemiScope 3000 mini，上海勤翔科学仪器有限公司)；全自动凝血分析仪(Sysmex CS-2000 i，成都协和生物技术有限责任公司)；血栓弹力图仪(CFMS LEPU-8800，北京乐普医疗科技有限责任公司)；化学发光成像分析仪(ImageQuantTMLAS 4000，美国通用电气医疗公司)；……