刘 芸，徐 恰，刘力伟，戚 楠，秦宜德，

作者单位：安徽医科大学基础医学院1生物化学与分子生物学教研室、2免疫教研室，合肥 230032

宫颈癌是全世界妇女最常见的癌症之一[1]，其存活率低，预后不佳[2]。化疗和放疗常见的是宫颈癌治疗方案。顺铂是常用的化疗药物，目前针对该药物的主要研究目标是不断提高药效以降低该药物的副作用及降低机体产生的耐药[3]。p62是一种自噬受体，近期被证明[4]可以将泛素化蛋白质递送到蛋白酶体进行降解。p62增加会延迟泛素化蛋白向泛素蛋白酶体系统的降解，而p62缺失会加剧细胞损伤。乳铁蛋白活性源六肽(LfcinB 4-9)来自于牛乳铁蛋白的乳铁蛋白抗菌肽(bovine lactoferricin，LfcinB)，是其活性中心，序列为RRWQWR，其中3个Arg残基(带有正电荷)通过肿瘤细胞外膜负电荷吸引而结合，通过翻转扩散(flip-flop)进入胞内。该文主要研究LfcinB 4-9增加药物敏感性的作用，探索LfcinB 4-9与DDP联合作用在宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移中发挥的作用，以期为宫颈癌治疗提供潜在的治疗方法。

1 材料与方法

1.1 主要材料与试剂本实验使用的Hela细胞、p62 KO Hela细胞由许尹教授(美国贝勒医学院)馈赠。LfcinB 4-9由上海生工公司合成; 顺铂购自云南植物药业有限公司；MTT购自美国Promega公司；TRIzol购自美国Thermo Fisher公司；逆转录试剂盒购自美国Thermo Fisher公司；PCR引物由上海生工合成；PCR MIX购自美国Promega；胎牛血清购自杭州四季青公司； Annexin V/PI双染凋亡试剂盒购自上海贝博公司。β-actin单克隆抗体、辣根过氧化物酶标记抗鼠IgG、辣根过氧化物酶标记抗兔IgG购自北京中杉金桥有限公司；SIAH抗体购自爱博泰克生物技术公司；……