李 梅，蒋锦梅，欧大明，黄丽芳，谢立虎，张 济

作者单位：南华大学衡阳医学院附属第一医院 1风湿免疫科、2风湿免疫实验室，衡阳 421001

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种慢性炎症性自身免疫病，临床病理表现为以类纤维细胞样化和膜细胞增殖浸润，可导致滑膜增生和关节损害[1-2]。有研究[3-4]报道，lncRNA不仅在RA患者外周血或滑膜组织中表达异常，还能参与调控RA滑膜细胞炎症、增殖、迁移和侵袭。新的研究[5]显示，lncRNA CASC2(简称CASC2)在RA患者血浆中表达水平较低，且过表达CASC2可促进人RA滑膜成纤维细胞凋亡。同时，也有研究[6]发现，miR-218-5p在RA患者关节滑膜组织及骨性关节炎患者软骨组织中高表达。但CASC2在RA滑膜组织中的表达情况及其是否可通过靶向调节miR-218-5p参与RA进程的调控，目前还未知。因此，该研究旨在检测CASC2及miR-218-5p在RA患者滑膜组织中的表达水平，并探讨CASC2对RA滑膜成纤维细胞炎症反应、迁移、侵袭中的影响，以期为RA靶向治疗提供新的潜在靶点。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1细胞与试剂 人RA滑膜成纤维细胞系MH7A来源于日本Tsukuba公司。RPMI-1640培养基、胎牛血清购自上海TBD公司；CASC2过表达质粒(pcDNA3.1-CASC2)及其空载质粒(pcDNA3.1-)购自武汉天一辉远生物公司；miR-218-5p模拟物(mimic)和阴性对照(mimic-NC)购自广州锐博公司；肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白细胞介素(interleukin-6，IL-6)和IL-1β试剂盒购自美国Biovalue公司；基质胶购自美国Corning公司；CCK-8试剂盒、BCA蛋白质检测试剂盒和双萤光素酶报告基因试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司；Lipofectamine 2000试剂盒购自美国Introvigen公司；PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser购自日本TaKaRa公司；GoTaq qPCR Master Mix试剂盒购自美国Promega公司； GAPDH抗体、MMP-2抗体、MMP-9抗体购自英国Abcam公司；辣根过氧化物酶(HPR)偶联的二抗购自武汉博士德生物工程有限公司；……