猕猴原代肾小球系膜细胞分离提取培养与鉴定
2022-09-21刘潇一张春梅蒋海峰董婷玉杨雪枝严尚学
刘潇一,张春梅,张 磊,许 振,魏 琦,蒋海峰,董婷玉,杨雪枝,严尚学,常 艳,魏 伟
作者单位:安徽医科大学临床药理研究所,抗炎免疫药物教育部重点实验室,抗炎免疫药物安徽省协同创新中心,安徽医科大学类风湿关节炎研究中心,合肥 230032
有报道[1]认为,大约10.8%的人群会受到肾脏疾病的影响。肾脏疾病主要损害的病理部位是肾小球,肾小球是肾组织中主要起滤过作用的单位[2]。肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells,GMCs)过度增殖是肾小球疾病(如肾小球肾炎、狼疮性肾炎、糖尿病肾病等)的主要病理特征[3]。
肾小球主要由内皮细胞、上皮细胞和GMCs组成。原代肾组织中细胞提取培养中,与内皮细胞与上皮细胞相比,GMCs是较易生长的肾小球细胞,因为它们的生长需求最小,增殖能力较强[4]。目前已有对大鼠、小鼠、兔、人及猪的GMCs分离方法的报道[5],但尚未见对猕猴原代GMCs分离方法的报道。有文献[6]报道称,可以利用小鼠肾脏进行GMCs培养,但其操作步骤繁琐,利用50、100目和200目三道筛网才能筛出纯度较高的肾小球组织。肾小球位于肾脏肾皮质部位,小鼠肾皮质部位小,需要足够量的小鼠肾组织才能贴出GMCs[6]。人原代GMCs的提取方法也有报道[7],但是取材较为困难(一般为胎儿的肾)。与其他实验动物相比,猕猴与人类的遗传基因、生理病理状态以及免疫反应和新陈代谢具有高度的相似性,社会行为也与人类似,是基础研究和临床应用之间的一个理想转化模型[8]。该研究结合已有的文献报道,以及GMCs的生理特性和生长要求,成功建立了猕猴原代GMCs的分离培养方法,并对其进行鉴定和功能研究,为进一步研究提供实验材料与工具。……
