张 帆，陈 丽，曹旭东，赵春辉，陈小林

作者单位：南方科技大学医院心内科，深圳 518055

缺血性心脏病是世界范围内严重危害人类健康的重要原因，再灌注治疗是挽救缺血心肌的关键[1]，然而再灌注损伤的存在极大限制了治疗效果，因此探讨心肌缺血再灌流(myocardial ischemia reperfusion, MI/R)损伤的发病机制，寻找有效的治疗方法一直是基础和临床研究的热点和难点。Sirtuins是一类高度保守的组蛋白去乙酰化酶家族，其中沉默信息调节因子1(silent information regulator,SIRT1)在心血管系统中研究最为广泛[2]，在应激下调控心肌细胞的存活和生长；此外，SIRT1在缺血再灌流损伤中保护心肌细胞免受氧化应激和细胞凋亡的影响[3]。

钠-葡萄糖协同转运蛋白2(sodium-glucose cotransporter 2, SGLT2)抑制剂如恩格列净(empagliflozin, EMPA)是一类新型的降糖物，选择性抑制肾近端小管SGLT2对葡萄糖的重吸收，降低血糖[4]。EMPA还表现出了不依赖降糖的心血管保护功能，包括降低血压、血脂和尿酸，控制体质量和改善肾功能损伤等[5]。EMPA-REG OUTCOME试验首次证实了EMPA具有心血管保护作用[6]。因此，该研究拟采用离体心脏MI/R模型，探讨EMPA通过激活SIRT1信号改善非糖尿病大鼠MI/R中氧化应激和细胞凋亡的作用。

1 材料与方法

1.1 试剂与动物EMPA和氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride,TTC)购自美国Sigma公司；丙二醛(malonaldehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和琥珀酸脱氢酶(succinodehydrogenase,SDH)含量和活性检测试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司；EX527购自美国Sigma公司，先用DMSO溶解后再用灌流液稀释；Cytochrome c、Cleaved caspase-3、SOD2、gp91phox和SIRT1抗体购自美国Cell Siginal Technology公司；GAPDH、辣根过氧化物酶标记的山羊抗鼠和山羊抗兔二抗购自武汉三鹰生物技术有限公司；……