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树突状细胞来源外泌体通过NF-κB通路影响内皮细胞致促炎因子的变化*

2022-07-08何洋安天志李成周石谢坪段庆红

贵州医科大学学报 2022年6期
关键词:实验

何洋,安天志,李成,周石,谢坪,段庆红**

(1.贵州医科大学 影像学院,贵州 贵阳 550004;2.四川省人民医院 介入科,四川 成都 610000)

动脉粥样硬化斑块属于血管炎性疾病的一种,主要原因是脂质聚集、免疫细胞浸润、或者纤维帽形成导致动脉管壁增厚。[1],亦认为树突状细胞(dendritic cells,DCs)也存在于血管壁炎性病灶中、并促进动脉粥样硬化斑块形成[2-3]。外泌体(Exosome)是一种极微小的囊泡结构,它的直径只有30~150 nm,并且能由机体内大多数细胞分泌,已知的膜蛋白、脂类、RNA以及DNA等在细胞生理活动过程中均可分泌外泌体[4-5]。研究表明成熟的DCs分泌的外泌体能促进血管内皮细胞的炎症反应,单核细胞来源的外泌体作为DCs的前体,可诱导细胞因子和黏附分子的分泌及表达[6]。综上所述,DCs可分泌外泌体和其它细胞沟通,例如通过外泌体调节血管内皮细胞、从而影响动脉粥样硬化疾病的进展。核转录因子Kappa B(nuclear factor kappa B,NF-κB)是蛋白质中的一种重要的转录调节因子,通过刺激因子的激活诱导各种基因的表达、并分泌多种细胞因子来参与调节机体的炎症反应[7]。研究表明动脉粥样硬化和纤维斑块中NF-κB的活性升高,但无动脉粥样硬化的病变血管内NF-κB几乎不表达[8-9]。因此,本研究从小鼠中分离骨髓DCs并培养获得外泌体,用分离得到的外泌体处理细胞,使用ELISA、PCR及Western blot方法检测相关蛋白的表达情况及外泌体的摄取,探讨DCs来源的外泌体对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的作用和机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1实验动物 均选于健康雄性8周龄的C57BL/6J小鼠,体质量范围在22~24 g,由贵州医科大学动物实验中心提供,于无菌、恒温及明暗交替的清洁级环境中适应性喂养7 d,术前禁食12 h,实验获得医院动物伦理委员会批准(1900921)。……

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