牛源肺炎克雷伯菌菌毛类型鉴定及fimA、mrkA基因序列分析
2022-06-09聂青青单文杰
聂青青,张 璇,黄 攀,单文杰
(1.赣州职业技术学院,江西赣州 341000;2.垫江县市政服务中心,重庆 408300;3.巴南区人民政府莲花街道农业服务中心,重庆 401321;4.共青城市农业农村水利局,江西九江 332020)
肺炎克雷伯菌(Klebsiellapneumoniae,K.pneumoniae)属肠杆菌科(Enterobaeteriaceae)、克雷伯菌属(Klebsiella),为革兰氏阴性短杆菌,是1种人畜共患病病原,也是引起多种动物患病的条件性致病菌,可引起肺炎、败血症、化脓性感染、支气管炎、尿路感染及脑膜炎等[1-3]。现有研究表明,菌毛是肺炎克雷伯菌的1种主要的毒力因子[4-5]。在感染过程中,细菌通过菌毛接近宿主黏膜表面或者吸附于宿主细胞,进而使机体致病[6]。肺炎克雷伯菌的菌毛可分为Ⅰ型和Ⅲ型菌毛[7]。Ⅰ型菌毛属于甘露糖敏感性(mannose-sensitive hemagglutination,MSHA)菌毛,即甘露糖存在时会阻断菌毛与红细胞的凝集现象,主要附着于尿道上皮细胞;Ⅲ型菌毛具有甘露糖抵抗血凝特性(mannose-resistant hemagglutination,MRHA),又称为甘露糖抵抗血凝特性菌毛,主要附着于呼吸道上皮细胞[8]。上述两种菌毛的主要结构亚单位基因为fimA和mrkA[9]。Ⅰ型菌毛由一组fim(B、E、A、I、C、D、F、G、H)基因群所表达,fimA是负责表达Ⅰ型菌毛柄的结构基因;Ⅲ型菌毛由一组mrk(E、A、B、C、D、F)基因群所表达,mrkA是负责表达Ⅲ型菌毛柄的结构基因。
本研究对近年在重庆、四川部分肉牛场分离到的20株肺炎克雷伯菌进行了MSHA/MRHA试验,鉴定其菌毛类型,并对20株菌的fimA基因和mrkA基因进行了测序及氨基酸序列分析。研究旨在揭示川渝地区克雷伯菌菌毛类型与fimA基因和mrkA基因的变异特点,为深入研究其致病机制提供参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料
通过棉拭子的方法采集重庆、四川部分肉牛场的牛上呼吸道黏液,分离细菌;……
