祖文轩,李 林,石 傲,叶子悦,燕博民,蒋邦红,张 莉*

(1蚌埠医学院解剖教研室,蚌埠 233030;2蚌埠医学院第一附属医院整形外科;*通讯作者,E-mail:drzhangli65@163.com)

富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)系全血经离心、分离后浓缩而来的血液制品,自1998年提出以来,已经广泛应用于临床[1]。其内血小板经激活后可释放多种生长因子,例如血小板衍生因子(PDGF)、血管生长因子(VEGF)、转化生长因子(TGF-β)等,在组织创伤局部建立有助于修复的微环境,现已广泛应用于皮肤、肌肉、骨骼等组织创伤的修复[2,3]。目前PRP的制备方法有多种,主要有手工离心分离法、PRP专用提取套盒、成分血单采制备等[4-6]。各种方法的制备过程中,对于全血的收集需要添加抗凝剂,目前广泛应用的抗凝剂为柠檬酸钠。但笔者发现EDTA抗凝管收集并浓缩到的PRP中含有更多血小板数量,对于这一步骤尚缺乏全国统一标准。本文采用3.8%柠檬酸钠抗凝管、EDTA抗凝管和肝素抗凝管分别提取收集PRP,检测血小板数量、形态及激活前后细胞因子的含量等,旨在探索抗凝剂对PRP浓缩及功能的影响。

1 材料与方法

1.1 实验对象

募集健康成年志愿者5名,年龄25～40岁,男3名,女2名。排除心脏病、糖尿病、高血压及高血脂、血液相关疾病等,近期有感染、创伤等疾病。志愿者均签署知情同意书。本研究经蚌埠医学院第一附属医院伦理委员会批准,批准号为2020KY045。

1.2 抗凝剂管

实验按采血抗凝剂的种类进行分组,共分为3组。实验组(EDTA组):EDTA紫头负压采血抗凝管,规格7 ml;阳性对照组(9NC组):3.8%柠檬酸钠蓝头负压采血抗凝管,全血:柠檬酸为9 ∶1,规格10 ml;阴性对照组(肝素组):肝素绿头负压采血抗凝管,规格5 ml。……