浸润型肺腺癌CT影像学特征与Ki-67表达的关系

2022-05-13郝以秀唐昭亮陈惠娴徐宏刚何文娟

影像研究与医学应用 2022年7期

郝以秀，唐昭亮，陈惠娴，徐宏刚，何文娟

（1广州市第一人民医院放射科广东广州 510000）

（2广州市第一人民医院病理科广东广州 510000）

在中国，肺癌的发病率和死亡率每年都在逐步上升[1]。肺腺癌是肺癌常见的病理学类型，其CT影像特征包括毛刺征、分叶征、空泡征及胸膜凹陷征[2]。Ki-67是一种存在于增殖细胞核基质内的抗原，它的合成、表达与细胞的增殖周期有关，可能是预测肺癌患者预后有价值的生物学标准，而该抗原目前需要活检才能证实其存在[3]。如果浸润型肺腺癌的某些CT特征可以提示肿瘤细胞增殖活跃并提示预后，那么通过非侵入检查即可实现。目前关于Ki-67的研究主要集中于肺癌的预后及临床疗效预测[4-5]，而对于浸润型肺腺癌CT征象与Ki-67的表达情况的意义，尚无相关报道。本研究分析浸润型肺腺癌CT影像学特征与Ki-67表达水平，探讨与浸润型肺腺癌增殖活跃相关的CT征象。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年1月—2020年7月间于广州市第一人民医院经病理活检证实的浸润型肺腺癌患者53例，排除其中6例，3例为胸腔积液穿刺确诊的病例，1例多发病灶，2例未行Ki-67检查，最终共有47例纳入本研究。患者年龄为36～80岁，女性患者24例，平均年龄（61.46±9.117）岁；男性患者23例，平均年龄（62.7±11.372）岁。

纳入标准：①单发病灶；②术前两周内行胸部CT检查者；③患者CT检查前未行穿刺活检、放化疗操作或治疗；④患者术前CT检查图像、术后病理及免疫组织化学资料均完整（术前CT检查图像包含胸部CT平扫或胸部CT增强扫描）。排除标准：①胸腔积液穿刺确诊的病例；②纵隔淋巴结穿刺确诊的病例；③合并有肺不张的肺癌；④中央型肺癌；⑤合并有其他癌症的病例。因本院能收集到的病例大部分为浸润型肺腺癌，将中央型肺癌排除在外一方面是因为浸润型肺腺癌大部分属于周围型肺癌，另一方面是因中央型肺癌通常与肺门淋巴结分界不清，不能准确测量病灶大小及观察其他征象。本研究基于真实的资料及创新于其他研究者的结果，分析浸润型肺腺癌的CT影像特征与Ki-67抗原表达水平,提高对于能提示肿瘤细胞增殖活跃的CT影像特征的认识。

1.2 方法

扫描时患者取仰卧位，用Toshiba AquilionTSX-301A或Philips Brilliance 64排螺旋CT完成胸部扫描。胸部CT扫描参数：电压120 kV，自动毫安。采集64×0.5 mm，重建层厚0.5～1.0 mm，重建间隔0.5～1.0 mm。采用高分辨CT扫描模式，肺算法，多平面重建（multi-planner reformation，MPR）。

图像分析：CT扫描获得的图像经医学影像信息（picture archiving and communication systems，PACS）系统传输，由两位胸部影像诊断医师各自盲法阅片，如果存在分歧，通过讨论解决。CT阅片时应用PACS进行MPR重建，在MPR重建图像上观察并记录肺腺癌结节的大小、分叶征、毛刺征、空泡征、空气支气管征、胸膜凹陷征的情况。肺结节病灶根据密度分为实性结节、部分实性结节、非实性结节，实性结节肺窗图像上完全遮盖肺纹理，部分实性结节肺窗图像上部分遮盖肺纹理，非实性结节肺窗图像上不遮盖肺纹理[6]。为了更清楚地显示病灶轮廓，所有病灶的测量和观察均是在肺窗图像上完成，设定肺窗1 600 HU/-600 HU。所有病灶大小的测量方法是肺窗横断面图像上病灶最大长径和同一层面垂直于最大长径的最大短径之和的平均值。肺窗图像上分叶征定义为肺腺癌病灶的轮廓呈浅波浪形；毛刺征定义为从病灶发出的线条样组织延伸至正常肺组织，但未触及胸膜表面；空泡征定义为病灶内直径2 mm以下的类圆形空气衰减影[2]；胸膜凹陷征是指自病灶局部延伸至胸膜表面并引起局部胸膜被牵拉[7]。空气支气管征定义为病灶内的含气支气管影。

1.3 组织病理学检查结果的获得及Ki-67评价

Ki-67浓缩型鼠抗人mAb，稀释比例为1:100，购自上海长嘉生物科技有限公司；抗体稀释液及EnⅤision试剂盒为Dako公司产品。标本经100 g/L甲醛固定，常规石蜡包埋，切片厚4 μm，HE染色，光镜观察，免疫组织化学用EnⅤision两步法。石蜡标本常规切片，脱蜡至无水后，于抗体修复液中微波修复，详细步骤按说明书进行。染色设已知阳性对照，阴性对照用磷酸盐缓冲液替代，二氨基联苯胺显色，苏木精复染。免疫组织化学结果判定：阳性信号为棕黄色、棕褐色，Ki-67表达于细胞核。每例切片至少随机选择10个高倍镜视野，取平均值。Ki-67在细胞核的阳性表达分为以下水平：≤5%，6%～10%，11%～20%，21%～30%，50%，60%～90%。以往的研究中笼统的将Ki-67的表达分为低表达、高表达或者阴性、阳性[8-9]，本研究定义的Ki-67的分级表达水平是基于病例中Ki-67表达情况而定，是为了明确CT影像学特征分别对应的Ki-67表达水平，这是本研究的另一创新点。本研究中有1例患者表现为50%的Ki-67表达情况，基于以往文献中定义的Ki-67≤40%低表达，Ki-67＞40%为高表达[8]，本研究中以Ki-67＞50%为高表达，Ki-67≤50%低表达。

1.4 统计学方法

应用SPSS 26.0统计软件分析数据，计数资料以频数、百分比（%）表示，行χ2检验；计量资料以（）表示，行t检验。P＜0.05则差异具有统计学意义。

2 结果

47例患者中包括34例实性结节肺腺癌病灶，9例部分实性结节，4例非实性结节。因本研究能获得的部分实性结节、非实性结节样本量少，没有对不同类型结节与K i-67的表达进行分析统计。浸润型肺腺癌大小与肺腺癌K i-67表达水平差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。浸润型肺腺癌分叶征、空泡征、空气支气管征、胸膜凹陷征与肺腺癌K i-67表达水平差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。浸润型肺腺癌毛刺征与K i-67表达水平差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。浸润型肺腺癌毛刺征在K i-67高表达时表现明显。

表1 浸润型肺腺癌结节大小与Ki-67的表达水平对比

表2 浸润型肺腺癌分叶征、毛刺征、空泡征、空气支气管征、胸膜凹陷征与Ki-67表达水平对比

3 讨论

3.1 Ki-67抗原与肺癌分化、治疗及预后的关系

Ki-67是一种存在于细胞核内的增殖抗原，也是目前最可靠的细胞核增殖标志物，Ki-67指数升高提示肿瘤生长活跃[3]。Jingang Yan等[10]研究表明分别有58%的肺原位癌、44%的微浸润型腺癌、7%的浸润型腺癌中Ki-67表达＜5%，Ki-67表达≥30%仅在浸润型肺腺癌中出现，提示Ki-67高表达与肺癌的浸润性相关。一项meta分析结果提示，Ki-67标记指数对非小细胞肺癌患者预后具有意义，高指数提示预后不良[11]。最新的WHO分类将Ki-67表达纳入小细胞肺癌的诊断中，高表达的Ki-67可能与小细胞肺癌的放疗敏感性有关[3]。因此，在术前利用CT影像资料预测Ki-67的表达，将有助于治疗方案的优化。目前的研究主要集中于非小细胞肺癌不同病理类型、肺腺癌不同病理亚型与Ki-67的表达差异，Ki-67的表达与某一种亚型肺腺癌的CT影像学特征之间的意义罕有报道。本研究基于浸润型肺腺癌CT影像学特征，分析其与Ki-67表达的意义，据我们所知，这是首次进行此类研究。

3.2 肺腺癌的CT影像学特征与Ki-67的关系

Jingang Yan等[10]研究发现，K i-67的表达与肺腺癌结节的直径、分叶征呈正相关，Spearman相关系数分别为0.58、0.436，其中非实性结节38%，部分实性结节41%，实性结节21%。本研究中浸润型肺腺癌结节大小与肺腺癌Ki-67表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）。分析原因，表现为实性结节肺癌增殖的速度低于亚实性结节[12]，本研究中72%的病灶为实性结节，Ki-67表达可能因此在不同大小的结节中不具有差异性。陈相猛等[2]的研究证实，浸润型肺腺癌的毛刺征、分叶征、空泡征、胸膜凹陷征的出现概率均显著高于非典型腺瘤样增生、原位腺癌、微浸润型腺癌（P＜0.05）。在该研究中，毛刺征、分叶征、空泡征、胸膜凹陷征在浸润型腺癌中的阳性率分别是38%、22%、15%、19%，表明毛刺征与浸润型肺腺癌的分化密切相关。Jingang Yan等[10]研究发现95例肺腺癌中（包括肺原位癌、微浸润型腺癌、浸润型腺癌），分叶征、毛刺征阳性者Ki-67表达≥30%的比例均有11%（P=0.001、0.021）。帕丽旦·尼亚孜等[9]研究表明在107例肺癌中（包括腺癌、鳞癌、腺鳞癌、小细胞肺癌），分别有13%、35%的毛刺征、深分叶征阳性者出现K i-67表达＞10%（P＜0.05）。本研究发现在浸润型肺腺癌中，有30%的毛刺征阳性者Ki-67表达60%～90%（P＜0.05），有30%的分叶征阳性者K i-67表达60%～90%（P＞0.05）。毛刺征形成的病理基础是病灶向各个方向生长，肿瘤细胞向邻近支气管血管鞘或局部淋巴管浸润扩散[13]。分叶征是由于瘤内纤维组织增生收缩、血管或淋巴管阻挡或病灶不同方向生长速度不同所致[14]。胸膜凹陷征是由于肺癌结节内的瘢痕牵拉，导致邻近的胸膜出现凹陷形成。空泡征和空气支气管征是因肿瘤细胞的不均匀浸润导致[15]。上述征象中与肺癌扩散浸润生长密切相关的征象是毛刺征，本研究结果也证实了这一点，表明毛刺征阳性与K i-67高表达有关，预示肿瘤细胞增殖活跃。