曾文雪

江西中医药大学，江西 南昌 330004

交联聚维酮（polyvininyl polypyrrodidone，PVPP）是由N-乙烯基2-吡咯烷酮经过交联反应得到的高分子水不溶性聚合物，为白色或近白色的粉末，无臭无味，流动性好，在水和各种溶剂中均不溶，也不溶解于强酸和强碱中，但遇水能迅速溶胀，体积增加150%至200%。它具有高度的毛细管活性和水合能力及相对较大的比表面积，可迅速地将大量水分吸收到片剂中，一旦片剂内部的膨胀压力超过药片本身的强度，药片瞬时崩解［1］。在药物制剂上以其崩解时间短、药物溶出快的独特优势得到广泛应用，交联聚维酮被称为片剂中的“超级崩解剂”之一［2］。

黄芩苷为唇形科植物黄芩（Suutellaria baicalensisGeorgi）的干燥根经提取获得的一种黄酮类化合物，结构上具有多元羟基。现代药理研究发现其有抗病毒、抗菌、抗炎、抗氧化等作用［3-6］,对心血管和脑损伤具有保护作用［7］，还具有抗内毒素和调节免疫的作用［8］。

PVPP 除具有较好的崩解作用外，还具有与聚乙烯吡咯烷酮相同的络合吸附能力，能亲水化各种不溶性药物，稳定化各种悬浮剂，能够络合多种物质，比如多酚类化合物、碘等多种物质［1］。在前期研究中发现，PVPP 对中药丹参中丹酚酸B 进行测定时，对其测定有一定的影响［9］。本文选择黄芩苷作为研究对象，探索PVPP 对其含量的影响。

1 仪器与试药

1.1 仪器

KQ-250 数控超声波清洗器（昆山市超声波仪器有限公司）；AL104 分析天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）；Agilent-1100 高效液相色谱仪（美国安捷伦公司，DAD 检测器）；DHG-92438-Ⅲ电热恒温鼓风干燥箱（上海新苗医疗器械制造有限公司）；数显气浴恒温振荡器（常州隆和仪器制造有限公司）。

1.2 试药

黄芩苷提取物（购于安徽亳州青源中药材站）；黄芩苷对照品（中药固体制剂制造技术国家工程研究中心，供含量测定用，批号：111483－202003201506）；交联聚维酮（德国巴斯夫公司）；色谱纯甲醇（上海振兴化工一厂）；分析纯磷酸（广东光华化学厂有限公司）；其余试剂均为分析纯。

2 试验方法与结果

2.1 黄芩苷对照品溶液的制备

取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 ml 含1 mg 的溶液，即得。

2.2 黄芩提取物溶液制备

称取0.05 g 黄芩提取物，精密称定，加入至500 mL 容量瓶中，加入水适量，置于微波超声仪中超声20 min，取出，放冷，加水至刻度，即得黄芩提取物溶液，备用。

2.3 黄芩苷溶液与PVPP 吸附样品制备

称取0.1、0.2、0.5、0.8、1.0、1.2、1.5、2.0 g PVPP分别置于8 个锥形瓶中，各加入20 mL 上述制备的黄芩提取物溶液，进行振荡吸附24 h 后，吸取上清液，用0.45 μm 微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。

2.4 不同时间PVPP 与黄芩苷吸附样品制备

称取10 g PVPP，加入上述黄芩苷溶液50 mL，分别于5、10、20、40、60、90 min 取样，用0.45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。

2.5 PVPP 与黄芩苷静态吸附与解吸附

称取PVPP 10.0 g，置于锥形瓶中，加入150 mL上述黄芩苷溶液，放入振荡器中振荡6 h（37 ℃），充分吸附后取出，抽滤，滤渣PVPP 干燥备用，滤液供含量测定用。

将抽滤后的PVPP 称取5 份，每份2.0 g，分别加入至锥形瓶，加入10%、30%、50%、70%、95%的乙醇各50 mL，放入振荡器中振荡6 h，进行解吸附后取出，静置15 min，吸取上清液，用0.45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。

2.6 黄芩苷与PVPP 制剂配比对黄芩苷吸附的影响

称取黄芩苷提取物2.4 g，按照表1 称样量进行混合物的制备［10］：用研钵将混合物研匀，分别称取五份混合物各0.1 g，放入1 000 mL 的容量瓶中，加入适量水超声20 min 使溶解，放冷，加水至刻度，摇匀。吸取上清液，用0.45 μm 微孔滤膜过滤，取续滤液，即得样品溶液。

表1 黄芩苷与PVPP配伍样品制备

2.7 黄芩苷与PVPP 混合物在不同介质中的吸附

称取黄芩苷提取物与PVPP 混合物0.1 g，各三份，分别加入200 mL 的人工胃液、人工肠液、水等进行超声处理20 min，使其溶解，放入振荡器中振荡6 h，取出，用0.45 μm 微孔滤膜过滤，取续滤液，即得样品溶液。

2.8 黄芩苷含量测定方法的建立

2.8.1 色谱条件 Agilent 1100，VWD 检测器；色谱柱：大连伊利特ODS2 C18 柱；检测波长230 nm；流动相：甲醇-水-0.1%磷酸（47∶53∶0.1）；流速：

1.0 mL/mim；柱温：室温。

2.8.2 标准曲线的制备 取“2.1”项配制的黄芩苷对照品，依次进样1、2、5、10、20、30 μL，按照上述液相测定方法测定含量，记录黄芩苷的峰面积。以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标作图，并进行线性回归，得回归方程Y=156.75X+6.350 2，r=0.999 9（n=5）。结果表明黄芩苷在1～30 μg 线性关系良好。

2.8.3 精密度试验 精密吸取上述对照品溶液10 μL，注入高效液相色谱仪，连续进样6 次，测定峰面积，计算黄芩苷峰面积的RSD 为0.38%，表明该方法精密度良好。

2.8.4 重复性试验 称取一定量的同一提取物六份，精密称定，按照样品制备的方法项下进行制备，依次进样，按照上述色谱条件下测定峰面积，RSD 值为0.40%。

2.8.5 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于制备后的0、2、4、8、12、24 h 进样，按照上述测定条件进行测定，以黄芩苷的峰面积计算，测得结果RSD值为0.87%（n=6），表明样品在24 h 内稳定性良好。

2.8.6 加样回收试验 取同一批已测定含量的“2.2”项提取物溶液10 mL 共9 份，分成三组，精密测定，分别精密加入一定量的对照品溶液，照供试品溶液的制备方法进行样品制备，测定样品中黄芩苷的含量，计算黄芩苷的平均回收率为99.53%，RSD为0.74%。见表2。

表2 黄芩苷加样回收试验结果

2.9 样品含量测定

2.9.1 黄芩提取物黄芩苷的含量测定 分别精密吸取对照品溶液以及供试品溶液10 μL，注入高效液相色谱仪，按照上述色谱条件进行含量测定，记录峰面积，并计算含量，即得。结果显示黄芩提取物中黄芩苷的含量为86.83%，对照品及样品图谱见图1。

2.9.2 不同量PVPP 对黄芩苷的吸附 精密吸取“2.3”项下制备的供试品溶液10 μL，注入高效液相色谱仪，按照“2.8.1”液相条件进行测定，结果见表3。结果可知，随着PVPP 加入量的增加，黄芩苷的含量呈现下降的趋势，最大下降超80%。其中加入量在0.1 g～1.2 g 区间时，下降的幅度显著，斜率较大，在1.2 g～2.5 g 的区间内，下降趋缓。

表3 不同量PVPP对黄芩苷吸附结果

2.9.3 不同时间PVPP 对黄芩苷吸附的影响 精密吸取“2.4”项下制备的供试品溶液10 μL，注入高效液相色谱仪，按照“2.8.1”液相条件进行测定，结果见图2。结果可知，PVPP 与黄芩苷的吸附较为快速，5 min 内即吸附达到最大，随着时间的延长，吸附量增加缓慢。

图2 黄芩苷吸附量随时间的变化

2.9.4 不同乙醇浓度对黄芩苷与PVPP 吸附的解析 精密吸取“2.5”项下制备的供试品溶液10 μL，注入高效液相色谱仪，按照“2.8.1”液相条件进行测定。计算解析率，见表4。结果可知，PVPP 与黄芩苷吸附后在30%～70%乙醇浓度下解析率较高，70%乙醇解析达到84.64%，浓度偏高或偏低都不利于其解析。

表4 PVPP 与黄芩苷吸附后在不同浓度乙醇下解析率

2.9.5 黄芩提取物及混合物在不同介质中的吸附 将黄芩提取物以及与PVPP 配伍后在水溶液、人工胃液、人工肠液中按照上述液相测定方法进行含量测定，结果可知，黄芩苷与PVPP 吸附后在人工胃液中，吸附更显著，检测出的黄芩苷量最少，而在人工肠液中，含量有所增加，可能产生了解离。见表5。

表5 不同介质下PVPP对黄芩苷的吸附结果

2.9.6 PVPP 与黄芩苷制剂配比含量测定 将制备的5%、10%、12%、15%、20%的样品溶液按照上述测定方法进行含量测定，结果可知，PVPP 对黄芩苷具有吸附作用，随着PVPP 在制剂中用量的增加，可检测出的黄芩苷含量呈现逐渐下降，当用量达到20%时，下降比例可达到50%以上。见表6。

表6 制剂配比下PVPP对黄芩苷的吸附结果

3 讨论

中药成分复杂，在制剂制备的过程中需要加入各种辅料，辅料对制剂的制备成型及药效发挥起到了关键的作用。药用辅料应是一种生理惰性物质，既不影响药物的药效，也不对人体产生毒副作用，但往往忽视了其对药品质量控制的影响。交联聚维酮是由N-乙烯基2-吡咯烷酮经过交联反应得到的高分子水不溶性聚合物，为一种惰性辅料，但其结构中具有内酰胺结构，可能与含有羟基（-OH）的物质形成吸附，在酿酒行业以及茶饮料上被广泛用作为澄清剂。

黄芩苷母体为黄酮类结构，其分子结构具有两个邻位酚羟基（Ar-OH）和一个葡萄糖酸的羧基（-COOH），可与PVPP 的内酰胺结构上的羰基形成氢键而被络合吸附，降低黄芩苷的含量。在人工胃液、人工肠液、水溶液中，可检测出的黄芩苷含量下降顺序为人工胃液＞水溶液＞人工肠液。其原因可能是黄芩苷在人工胃液呈分子状态，有利于与PVPP 氢键的形成，含量降低较多；而在人工肠液中黄芩苷则呈离子状态，不利于氢键的形成，含量变化不明显。

黄芩苷与PVPP 具有吸附作用，随着PVPP 量的增加，黄芩苷含量随之降低，当制剂中用量达到20%，含量可下降50%。在制剂的生产过程中应注意PVPP 对黄芩苷成分的影响，尤其在选择指标进行含量测定时，需要充分考虑其影响。当然，含量的下降对药效是否会产生影响，需要后续进一步深入研究。