丁凯雯 颜培正 张 敏

[山东第一医科大学第一附属医院(山东省千佛山医院)产科，山东 济南 250014]

近年来，不孕症发病率呈现出不断上升趋势，但其发病原因仍不明确。有研究认为[1-2]，不孕症的发生可能与体内炎症因子变化及免疫学因素相关。高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1，HMGB1)属于非组蛋白，其含量丰富且高度保守。近年来研究显示，HMGB1可调节炎性反应过程，通过调控细胞内多种免疫因子的变化影响不孕症的发展[3-4]。本实验通过观察当归四逆加吴茱萸生姜汤对不孕症模型大鼠免疫HMGB1及自噬蛋白Beclin-1的表达及血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)、干扰素γ(IFN-γ)、免疫球蛋白G(IgG)的调控作用，探讨当归四逆加吴茱萸生姜汤治疗不孕症的基本机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物 SPF级雌性Wistar大鼠60只，3月龄，体质量(180±20)g，由济南大学实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK(鲁)2019-0001。自由进食、饮水，室温(23±2)℃，相对湿度60%。

1.2 实验药物及试剂 当归四逆加吴茱萸生姜汤药物组成：当归45 g，桂枝45 g，白芍45 g，细辛25 g，通草30 g，吴茱萸140 g，生姜125 g，大枣25枚，炙甘草30 g。置于凉水中浸泡2 h，蒸煮30 min后浓缩至浓度为0.5 g/mL的药液。丙酸睾酮注射液(天津金耀药业有限公司，国药准字H12020532)；枸橼酸氯米芬片(Medochemie Ltd.，进口药品注册证号H20140688)；TNF-α酶联免疫吸附(ELISA)检测试剂盒(批号：K1052-100)、IL-1 ELISA检测试剂盒(批号：BEK-2309-1P)、IFN-γELISA检测试剂盒(批号：BEK-2119-1P)、IgGELISA检测试剂盒(批号：BEK-2104-2P)，均购自武汉艾美捷科技公司；兔抗大鼠HMGB1抗体(批号：H00003141-M)、兔抗大鼠自噬蛋白Beclin-1抗体(批号：R-141-100)、辣根过氧化物酶标记羊抗兔抗体(批号：A470012)，均购自北京博尔西科技有限公司；20%乌拉坦溶液(3 mL/kg)(国药集团化学试剂有限公司)；……