蔡 晶 巫梦雪 张 婷 王 琳

宫颈癌是一种常见的妇科恶性肿瘤，其发生率及病死率较高，且发病年龄有年轻化趋势[1]。肿瘤细胞的生长和转移是宫颈癌患者死亡的主要原因[2]。目前，手术治疗、化疗、免疫治疗、放疗等是其主要治疗手段，然而部分患者的预后较差[3]。宫颈癌的发病机制并未完全阐明，探究宫颈癌进展的分子机制可能对其临床治疗具有重要意义。长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度不少于200个核苷酸的内源性RNA分子，其在不同肿瘤中的表达趋势差异显著，lncRNA通过参与调节肿瘤细胞内的生物学过程，影响肿瘤的发生和进展[4, 5]。

LINC00598在乳腺癌、结直肠癌、肝癌等肿瘤细胞系中高表达，可促进肿瘤细胞的增殖[6]。LINC00598在宫颈癌发展和转移中的作用机制并不清楚。本研究通过DIANA数据库预测发现LINC00598与miR-381-3p存在靶向序列。Shang等[7]研究表明，miR-381-3p通过直接靶向成纤维细胞生长因子7(fibroblast growth factor 7，FGF7)抑制宫颈癌进展。本研究旨在检测LINC00598在宫颈癌细胞系中的表达，通过在宫颈癌细胞系中沉默LINC00598表达，验证LINC00598对miR-381-3p表达的调控作用及对宫颈癌细胞增殖和侵袭的影响。

材料与方法

1.细胞与试剂:宫颈癌细胞C33A、HeLa、SiHa、HCC94及人正常宫颈上皮细胞H8购自美国标准培养物保藏中心。双荧光素酶报告基因试剂盒购自美国Promega公司。胎牛血清、DMEM/F12培养基、RPMI 1640培养基、胰蛋白酶购自美国Amresco公司。无意义阴性序列、LINC00598小分子干扰RNA(siRNA:GGAUGUCUACAUAGAUUUAGA)、荧光素酶报告载体(LINC00598野生型载体、LINC00598突变型载体)、miR-381-3p模拟物、miRNA阴性对照购自上海吉玛生物制药有限公司。qRT-PCR试剂盒、反转录试剂盒购自日本TaKaRa公司。……