日本血吸虫p38MAPK的克隆、表达和功能初步分析
2021-12-27李慧民BikashGiri刘军涛夏天奇王立辉杜鹏飞陈永军HanifUllahAbdulQadeer程国锋
李慧民,李 雪,Bikash R. Giri,刘军涛,夏天奇,王立辉,2,杜鹏飞,陈永军,Hanif Ullah,Abdul Qadeer,程国锋
(1.中国农业科学院上海兽医研究所 农业农村部动物寄生虫学重点实验室,上海 200241;2.天津农学院,天津 300384)
p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)是一种具有重要调控作用的蛋白激酶,已有研究表明p38在猪、牛、小鼠等哺乳动物卵母细胞的减数分裂过程和胚胎发育中具有重要的调节作用[1-5]。在曼氏血吸虫(Schistosoma mansoni)中,研究表明Smp38MAPK对血吸虫的纤毛摆动速度具有调节作用[6],而且抑制Smp38MAPK的活性会显著降低毛蚴向母孢蚴的发育[7]。最近研究表明抑制Smp38MAPK可导致曼氏血吸虫雌虫的产卵量下降,成虫体表受损,卵巢发育不全[8]。另外,还有研究表明曼氏血吸虫Smp38MAPK还调控参与抗氧化防御、核糖体结构组成、剪接体、细胞骨架以及嘌呤和嘧啶代谢途径相关等重要信号通路[8]。
本实验室前期通过磷酸化蛋白质组学研究发现日本血吸虫Sjp38MAPK是多个信号通路的关键节点。为深入阐明Sjp38MAPK在日本血吸虫的生殖发育与产卵过程中的作用,本研究对Sjp38MAPK基因进行了克隆、表达及鉴定。另外,利用RNA干扰技术,对Sjp38MAPK在日本血吸虫的生殖和发育中的功能进行了初步研究。
1 材料和方法
1.1 生物材料及试剂清洁级昆明小鼠购自上海杰思捷实验动物有限公司,雄性健康小鼠,8周龄;日本血吸虫尾蚴购自中国疾病预防控制中心上海寄生虫病预防控制所,经腹部皮肤感染至昆明小鼠体内,在感染后相应时间,通过肝门静脉灌注法,收取虫体。RNAiso Plus购自上海皓嘉科技发展有限公司;……
