许 静 高 琳 洪马林 赵 盼

暨南大学第二临床医学院 深圳市人民医院 1 病理科 2 临床医学研究中心，广东省深圳市 518000

随着对人类基因组研究数据的不断探索发现，非编码RNA在整个基因组中占据98%的作用，长链非编码RNA简称lncRNA，是一种长度>200个核苷酸，但不具有蛋白质编码功能的序列RNA。研究表明，lncRNA作用于细胞的增殖、分化、凋亡及免疫功能，并且与各种肿瘤密切相关，参与肿瘤的发生、发展过程[1-2]。一类长度在60～300个核苷酸，表达在核内的小核RNA(snRNA)，常存于宿主基因内含子中，发挥着抑制或促进肿瘤细胞增殖的功能。而小核RNA宿主基因17(Small nucleolar RNA host gene 17，snhg17)作为一种重要的lncRNA，在肺癌、胃癌、结肠癌等多种肿瘤组织表达上调，且与临床预后及分期显著相关[3-5]。迄今为止对于snhg17在乳腺恶性肿瘤的具体分子机制，尚未见相关报告。因此探讨snhg17的功能，对于发现乳腺肿瘤特异性标志物及治疗预后具有深远的研究意义。

动物模型作为一种非常实用的实验研究工具，可以模拟出肿瘤的免疫表型，因此构建snhg17-KO基因敲除小鼠模型，对于后续实验研究具体机制及探寻肿瘤治疗至关重要。使用细胞生物手段解析靶基因功能的基因编辑技术，其中CRISPR/Cas9系统，具有高效、简单的优势，被实验室广泛应用，该项技术包括两个重要步骤：一是Cas9蛋白执行剪切功能；二是guide RNA(gRNA)特异性将Cas9蛋白引导至靶DNA序列[6-7]。我们让gRNA与Cas9蛋白结合构成复合物，使用gRNA引导并识别目的基因靶点，再进行Cas9蛋白对目标序列的切割。本研究拟通过选取snhg17基因1-6号的外显子，进行gRNA条件性有效敲除C57BL/6小鼠基因组中的snhg17基因，以达到构建snhg17-KO基因敲除小鼠模型的目的，为后续深入探讨snhg17在肿瘤中的分子机制提供优质的实验动物模型。