李玢，张誉腾，鲁峰

南方医科大学南方医院整形美容外科，广州 510515

骨骼肌的损伤修复是临床治疗的一大难题，研究证实低氧通路活性与骨骼肌再生能力密切相关[1]。低氧诱导因子（hypoxia inducible factor，HIF）以及血管内皮细胞生长因子A（vascular endothelial growth factor-A，VEGF-A）等被认为是促进肌肉再生的重要因素[2,3]。当外界氧气含量下降时，活性HIF-1α转移到胞核内，与HIF-1β结合形成特定的低氧应答元件，可以激活下游对血管生成、红细胞生成等重要基因的表达，从而恢复机体微环境的氧代谢平衡[4]。HIF-1α和HIF-2α进入细胞核的过程，以及异二聚体结合诱导缺氧相关基因的表达都是需要与芳基烃受体核转运子（aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator，ARNT）相结合的。ARNT即HIF-1β，属于碱性螺旋环螺旋helix-loop-helix（bHLH）-Per-ARNT-Sim家族[5]。ARNT作为一个重要的转录调节器，已经被证实参与器官发生，神经发育，以及胎儿生长受限中的血管化受损，并与癌、糖尿病、黑色素瘤等疾病密切相关[6,7]。但在骨骼肌再生过程中，ARNT的作用尚未得到评估。本课题围绕ARNT在骨骼肌老化及再生过程中的作用及机制进行深入研究，探索改善骨骼肌再生能力的方法。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 幼龄组C57BL/6小鼠48只（8～10周、雌雄各半），老龄组C57BL/6小鼠48只（22～24个月、雌雄各半）。环境恒温、恒湿，每笼饲养小鼠不超过5只，12 h昼夜规律交替，小鼠可随意取食、饮水。

本实验使用了可诱导的Cre-lox小鼠品系。ARNTfl/fl小鼠曾被用作高效敲除组织特异性的ARNT相关实验的动物模型[8]。首先，将转基因的老鼠品系ARNTfl/fl小鼠与可调控的、其骨骼肌中表达含人骨骼肌肌动蛋白α-actin（HSA）-Cre ER基因的Cre小鼠进行杂交，获得一个新的转基因小鼠品系。……