徐莉，李敏

国家药品监督管理局药品审评中心，北京100022

目前国外已有应用CpG ODN 作为佐剂的预防性疫苗上市，且多个疫苗处于临床试验研究阶段，国内也有疫苗正在开展临床试验研究，成为目前疫苗研发的热点之一。本文拟对CpG ODN 佐剂的相关研究进展作一报道，并从技术审评角度对其药学研究提出一些思考。

1 CpG ODN 佐剂的概述

CpG ODN（CpG 基序的寡核苷酸，以下简称CpG）中文名称为非甲基化胞嘧啶和鸟嘌呤二核苷酸为核心的寡聚脱氧核苷酸，是人工合成的18 ~ 30 bp 的具有免疫刺激活性的非甲基化胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷酸的DNA 重复序列，其中为提高其稳定性并延长其体内半衰期，部分或全部磷酸二酯键被硫代磷酸二酯键取代。CpG 根据其结构特征，可不同程度诱导细胞免疫和体液免疫，增强机体免疫应答。

CpG 的早期研究源于对癌症的治疗。TOKUNAGA 等［1］通过对牛减毒分枝杆菌提取结核素，证实了细菌DNA 具有抗肿瘤和提高NK 活性的功能，能够诱导Ⅰ、Ⅱ型干扰素的产生。随后的研究发现，非甲基化的CpG DNA（即CpG 基序）也具有免疫刺激作用［2］。非甲基化CpG 广泛存在于原核生物如细菌基因组中，人和脊椎动物的CpG 绝大多数被甲基化，仅有非甲基化的CpG 具有免疫刺激效应。

人B 细胞及pDC 细胞是表达TLR9 并直接对CpG 刺激产生应答的细胞。CpG 与TLR9 结合后，通过MYD88、IRAK 和TRAF6 最终激活多种转录因子，包括 NF-κB、AP1、CEBP 和 CREB。这些转录因子直接上调细胞因子和趋化因子基因表达。CpG 通过激活这些细胞启动免疫刺激，最终导致自然杀伤细胞（NK）间接成熟、分化和增殖的级联反应，T 细胞和单核细胞／ 巨噬细胞一起分泌细胞因子和趋化因子，产生促炎症因子（IL-1、IL-6、IL-18 及 TNF）和Th1偏向性免疫（IFNγ、IL-12）［3］。……