周永飞，韩顺子，赵丹莹，张健锋，常军亮，刘玉林，曹玉锋，刘景会

1.长春生物制品研究所有限责任公司，吉林长春130012；2.怡道生物科技（苏州）有限公司，江苏苏州215004

白介素-1（interleukin-1，IL-1）是人体内重要的细胞因子，不仅参与B 细胞的增殖与分化，还参与炎症反应等［1］，在真核细胞表面存在白介素-1 受体1（interleukin-1 receptor 1，IL-1R1）和白介素-1 受体 2（IL-1R2）两种受体，IL-1R1 是IL-1 的主要功能受体，IL-1 与 IL-1R1 及辅助受体（interleukin-1 receptor accessory protein，IL-1RAcP）结合后形成复合体，触发信号通路从而传导信号［2］。IL-1 与IL-1R1 结合后的信号传导与多种疾病的发生密切相关，如类风湿关节炎、痛风等多种炎性疾病及冷吡啉相关周期性综合征（cryopyrin-associated periodic syndromes，CAPS）、新生儿多系统炎症性疾病（neonatal onset multisystem inflammatory disease，NOMID）、成人 Still 病、川崎病等多种罕见疾病［3-5］。

人源化单克隆抗体作为治疗性药物已广泛应用于临床，目前已上市的药物有针对IL-1β 的人源化抗体卡纳单抗及IL-1R 拮抗剂等，作用机理均为阻断该信号通路的传导［6］。IL-1R1 单克隆抗体作为阻断该信号通路的一种方法，已有临床研究报道证明其效果显著，更长的给药周期避免了每天注射IL-1R 拮抗剂的不便，为类风湿性关节炎、痛风等多种疾病的治疗带来了新的思路［7-8］。本实验采用原核表达系统表达IL-1R1 胞外域，包涵体纯化后免疫小鼠，并对小鼠血清抗体进行鉴定，为后续单克隆抗体筛选及细胞受体功能的研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 细胞、质粒及菌株 A375·S2 细胞由本公司细胞因子室提供；载体pET-28a、感受态E.coli DH5α、感受态OverExpress（DE3）均由本公司生物技术研究室保存。

1.2 主要试剂及仪器 RNA 提取试剂盒、反转录试剂盒、pfu-DNA 聚合酶、限制性内切酶NdeⅠ和Hind Ⅲ、T4 DNA 连接酶、鼠抗His 标签单克隆抗体、凝胶回收试剂盒及质粒小提试剂盒均购自北京全式金生物技术公司；……