杨璐瑜，陆辉志，廖友霞，谭赟，董辉，付守芝

武汉市第三医院重症医学科，湖北武汉430074

急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）是常见的急危重症之一，其发病率及致死率居高不下［1］。近年来，再灌注治疗手段已成为抢救AMI 患者最有效的措施，可显著改善患者预后［2］。但再灌注治疗易引起心肌缺血再灌注（ischemia reperfusion，I ／ R）损伤。心肌 I ／ R 损伤是指缺血心肌的血液供应重新恢复后，心肌组织的损伤反而加重的现象。其中，心肌I ／ R 损伤诱导的心肌细胞凋亡是导致心肌梗死面积增大及心功能障碍的重要因素［3］，因此，研究心肌细胞凋亡的机制将为该病的防治提供新的思路。微小RNA（microRNA，miR）是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的高度保守的非编码小RNA。目前已有多种miR 被证实参与心肌 I／R 损伤的病理过程，包括 miR-1、miR-29、miR-499 等［4-6］，但关于 miR-124 在心肌 I ／ R 损伤中的调控作用尚无报道。本研究利用缺氧 ／ 复氧（hypoxia ／ reoxygenation，H ／ R）干预大鼠心肌细胞 H9c2以模拟心肌I ／ R 损伤，旨在探讨miR-124 在心肌细胞I ／ R 损伤中的作用及其机制。

1 材料与方法

1.1 细胞及质粒 大鼠H9c2 心肌细胞系、HEK293细胞系购自中国科学院上海细胞中心；psi-CHECK2荧光素酶报告基因质粒由武汉福因德生物科技有限公司设计并提供。

1.2 主要试剂及仪器 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒、双荧光素酶报告基因检测试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司；LipofectamineTM2000试剂、SYBR Green qPCR 试剂盒、PVDE 膜购自美国Invitrogen 公司；胰酶、胎牛血清（BSA）及高糖DMEM购自美国 GIBCO 公司；兔抗人 STAT3、Caspase-3、Bax多克隆抗体购自美国Cell Signaling Technology 公司；羊抗兔IgG-HRP 购自武汉博士德生物工程有限公司；STAT3 蛋白抑制剂Stattic 购自英国Abcam 公司；……