刘腾飞，章延嘉，李大力，齐亚磊，韩红辉，马雪云

（华东师范大学生命医学研究所，上海 201100）

随着生命科学技术的快速发展，转基因实验动物的应用越来越广泛[1-4]。小鼠作为生物医学研究领域中使用最广泛的实验动物之一，基因工程小鼠也随之增多，为了长期保存重要基因型小鼠，需要长期饲养，不仅占用大量的空间、人力和经费，还容易造成基因污染和漂移最终导致基因丢失，而将小鼠精子进行冷冻，不仅可以将重要基因型进行长期储存，还可以避免由于长期饲养所引起的活体动物间疾病传播，同时方便长距离运输和国际间基因资源的交流。

谷氨酰胺（Gln）在动物体内含量非常丰富，约占总游离氨基酸的25%，是合成氨基酸、蛋白质、核酸和多种生物活性物质的前体。有研究表明，Gln 具有抗氧化、抗炎、提供能量、提高免疫等作用[5-7]。除以上功能外，Gln 会参与谷胱甘肽（GSH）的合成，参与GSH清除体内过氧化物的反应。为提高小鼠精子冷冻复苏后的存活率，提高冷冻精子的体外受精率，本研究在小鼠精子冻存液（CPA）中添加不同浓度的Gln，探讨其在小鼠精子冷冻保护中的作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物 14 周龄野生型SPF 级C57BL/6 雄鼠10只，4 周龄野生型SPF 级C57BL/6 雌鼠40 只，由华东师范大学闵行校区实验动物中心提供，生产许可证编号为[SCXK（沪）2016-0004]，使用许可证编号为[SYXK（沪）2015-0011]，屏障环境温度为21～25℃，湿度为40%～60%，光照周期为12 h:12 h，小鼠生存期间自由饮水和采食。本实验动物福利伦理批准编号为（m202002015）。

1.2 试剂与仪器 脱脂奶粉、Gln（Beyotime，ST083)、D（+）-棉子糖五水合物（aladdin，R111688）、冻精复苏液和体外受精液（HTF）均为本实验室自行配制。……