陈 丹，胡浚伟，李红叶，冯 斌

连翘提取物调控miR-223-3p对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤的影响

陈 丹1，胡浚伟2，李红叶1，冯 斌3*

1. 驻马店市中心医院 儿内一科，河南 驻马店 463000 2. 黄淮学院医学院 内科教研室，河南 驻马店 463000 3. 河南中医药大学第一附院医院 儿科，河南 郑州 450000

探讨连翘提取物对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞A549损伤的影响及其可能作用机制。采用肺炎链球菌感染肺泡上皮细胞A549建立细胞损伤模型，不同剂量的连翘提取物处理细胞；微小RNA-223-3p（micro RNA-223-3p，miR-223-3p）特异性寡核苷酸抑制剂（anti-miR-223-3p）及其阴性对照序列（anti-miR-NC）分别转染至A549细胞后用肺炎链球菌培养细胞；miR-223-3p寡核苷酸模拟物（miR-223-3p mimics）转染至A549细胞后用连翘提取物处理细胞，然后用肺炎链球菌培养细胞。MTT、流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡能力；ELISA法检测白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、γ干扰素（interferon γ，IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-10（interleukin-10，IL-10）的水平；qRT-PCR法检测的表达量；Western blotting法检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved cysteinyl aspartate-specific protease-3，cleaved Caspase-3）蛋白表达量。连翘提取物能够以剂量相关方式增强肺炎链球菌感染的A549细胞活力（＜0.05），升高IL-10水平（＜0.05），降低细胞凋亡率和cleaved Caspase-3蛋白表达水平（＜0.05），还可降低的表达量和IL-6、INF-γ、TNF-α的水平（＜0.05）；转染anti-miR-223-3p后感染肺炎链球菌的A549细胞活力和IL-10的水平升高（＜0.05），细胞凋亡率和cleaved Caspase-3蛋白水平降低（＜0.05），IL-6、INF-γ、TNF-α的水平降低（＜0.05）；转染miR-223-3p mimics可逆转连翘提取物对肺炎链球菌感染的A549细胞增殖、凋亡及炎症反应的作用。连翘提取物可能通过抑制的表达而促进细胞增殖及抑制细胞凋亡、炎症反应从而减轻肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤。……