马雪莲，李 慧，常 奕，王 筝，王香婷,，王琬瑶，许庆友

(1.河北省中西医结合肝肾病证研究重点实验室，2.河北中医学院，河北 石家庄 050091)

梗阻性肾病占成人慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)病因10%，也是儿童终末期肾病的首要病因[1]。炎性损伤和肾脏固有细胞损失是梗阻性肾病的重要原因。动物研究表明，凋亡、自噬、坏死或细胞转化可引起肾脏固有细胞急剧减少[2]。肾脏固有细胞损失可促进肾脏纤维化和肾功能恶化。焦亡，一种新的可调节性细胞死亡方式，不仅导致细胞减少而且带来严重炎症损伤，近来在心血管和肾脏领域颇受关注。有报道称梗阻性肾病时血浆醛固酮升高可导致肾脏巨噬细胞焦亡，而关于肾脏固有细胞焦亡少有研究。本实验采用醛固酮体外刺激人近端肾小管上皮细胞(HK2)，观察补气活血解毒方含药血清及依普利酮对于DNA损伤、盐皮质激素受体NR3C2、血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1 (serum and glucocorticoid-induced protein kinase 1，SGK-1)、核因子кB(nuclear factor кB，NF-κB)、焦亡信号通路相关蛋白NLRP3(nucleotide-binding oligomerization domain-like pyrin domain containing protein 3)、caspase-1和IL-1β的调控情况，研究补气活血解毒方含药血清及依普利酮抑制盐皮质激素受体活化导致的HK2细胞焦亡的作用机制。

1 材料与方法

1.1 药物依普利酮：购自美国Abcam公司(粉剂，批号APN12608-1-1)，用DMSO配制成100 mmol·L-1的溶液。醛固酮：购自美国Cayman公司(粉剂，批号0487439-4)，用无水乙醇配制成10 mmol·L-1溶液。补气活血解毒方含药血清：5只Wistar大鼠，清洁级，♂，购自河北省实验动物中心(合格证编号1605359)用于血清制备。补气活血解毒方采用一方制药公司(广东)的配方颗粒剂，药味包括金银花(批号6020961)、黄芩(批号6033511)、黄芪 (批号403196T)、赤芍(批号 311400T)、醋鳖甲(批号6013581)、地龙(批号6033291)，质量配伍比例为20 ∶18 ∶40 ∶20 ∶7 ∶10。……