周 毅，杨亚坤，康 平，柳 丹，夏顺杰，张 悦，刘 巍

(河北医科大学 1.第二医院、2.病理学教研室、3.诊断学教研室，河北 石家庄 050017)

慢性肾脏疾病(chronic kidney disease，CKD)可导致渐进性、不可逆性的肾单位丢失和肾组织损伤，继而出现肾功能障碍，并最终进展至终末期肾功能衰竭(end-stage renal disease，ESRD)。肾脏纤维化是多种慢性肾脏疾病发生、发展的中心环节和重要特征，是其进展至ESRD的共同通路之一[1-2]。早期明确诊断并采取针对性治疗，可有效延缓肾脏纤维化的发生和进展。但是，一直以来，由于纤维化的诊断缺乏早期、精准的特异性标志物，使得其治疗亦缺乏针对性。因此，阐明其发病机制，对于预防及早期干预疾病的发生发展具有重要意义。转化生长因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)是一类重要的致纤维化生长因子，其家族成员TGF-β1在肾脏细胞中有广泛表达，可通过抑制细胞外基质(extracellular matrix，ECM)降解，在肾间质基质沉积中发挥重要作用。细胞周期素依赖性蛋白激酶5(cyclin-dependent kinase 5，Cdk5)作为一种蛋白激酶，通过磷酸化相应底物发挥其生理学作用。本课题组前期研究发现，高糖、TGF-β1等因素，可导致p35断裂为p25，继而激活Cdk5，使其激酶活性异常升高，在糖尿病肾病足细胞损伤及凋亡的发生、发展过程中发挥重要作用[3-4]。本文在此基础上，以人肾小球系膜细胞为研究对象，重点探讨TGF-β1调控Cdk5表达在系膜细胞外基质沉积中所起的作用，以期进一步明确TGF-β1促进肾脏纤维化的作用机制，为探索肾脏纤维化的有效防治提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1实验试剂 DMEM/F12培养基(Gibco)、胎牛血清(Gibco，No.10100147)。TGF-β1(MCE，HY-P7118)，Roscovitine(Abcam，ab141847)，0.25%胰蛋白酶(Solarbio，No.T1300)。……