胡志高, 欧阳艳红

(海南省人民医院 急诊科, 海南 海口, 570000)

保护心肌细胞免受缺血损伤是治疗急性心肌梗死(AMI)的重要策略[1], 随着分子生物学的不断发展, AMI的靶向治疗已成为学者关注的焦点[2]。研究[3]发现，相比于心绞痛患者, AMI患者血浆中lncRNA表达谱存在显著差异，以PAX8反义RNA 1(PAX8-AS1)等表达较为突出。还有研究[4]表明PAX8-AS1-N(PAX8-AS1的一种转录本)可通过与miR-17-5p相结合，上调miR-17-5p相关靶基因，降低细胞活力，抑制细胞周期进展，诱导乳腺癌细胞凋亡。基于此，本研究推测PAX8-AS1可能对AMI的心肌细胞凋亡起到一定调控作用，参与AMI的发生发展。然而，现阶段有关PAX8-AS1在AMI进展中的作用及其机制尚不明确。本研究检测了AMI小鼠PAX8-AS1的表达水平，利用体内敲减实验探究PAX8-AS1对AMI小鼠心肌细胞凋亡的调控影响，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 动物与试剂

1.1.1 实验动物: SPF级雄性C57BL/6J小鼠130只, 20～25 g, 购自北京维通利华实验动物技术有限公司，动物生产许可证号: No. 11400700309252: 饲养条件: 标准饲料及环境进行喂养(昼夜周期交替)，保持通风，适应性饲养1周。本试验遵循本院实验动物伦理委员会标准实施，且受其监督。

1.1.2 试剂及器材: Image-Pro Plus 6.0系统购于美国Media Cybernetics公司; 光学显微镜购于北京世纪科信科学仪器有限公司; 红四氮唑(TTC)染色试剂盒购于上海BestBio贝博生物公司; 末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP镍端标记(TUNEL)凋亡试剂盒购于南京凯基公司; 激光扫描共焦显微镜购于日本OLYMPUS 公司; 裂解的半胱天冬酶-3(Cleaved-caspase3)、B淋巴细胞瘤-2相关x蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)相关抗体均购于Proteintech公司: BCA试剂盒购于Abcam公司; RNA提取试剂……