枸杞多糖通过Nrf2/HO-1信号对百草枯致肺损伤的保护作用
2021-12-15张志俊刘科蓝
朱 宇,张志俊,刘科蓝
0 引 言
百草枯(paraquat, PQ)中毒是最常见的中毒类型之一。由于缺乏有效的特异性解毒药物,百草枯中毒患者的病死率极高,达到60%~80%[1]。由于肺部的主动摄取机制,百草枯常积聚于肺并引起肺损伤和肺纤维化。百草枯中毒引起肺组织病变的相关分子机制并不明确,主要涉及氧化-抗氧化失衡、脂质过氧化、炎症激活和细胞凋亡等病理生理过程[2]。近年来,中药以及中药相关活性成分对肺损伤的保护作用逐渐受到重视,如血必净[3]、牛蒡子苷元[4]等。其中枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides, LBP)被认为具有抗氧自由基、抗肿瘤、免疫调节等作用,具备一定的转化应用价值[5]。本研究拟探究枸杞多糖对百草枯所致大鼠肺损伤的保护作用并初步探索潜在的作用机制。
1 材料与方法
1.1 主要试剂枸杞多糖(Solarbio, 纯度≥90%),百草枯(Sigma公司),羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量测定试剂盒(Solarbio),髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)测定试剂盒、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量检测试剂盒、超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase, SOD)活性测定试剂盒(南京建成生物工程研究所),白细胞介素-1β(IL-1β)检测ELISA试剂盒、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)检测ELISA试剂盒(上海碧云天公司),蛋白质免疫印迹(Western blot)检测核转录因子NF-E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)、β-actin相关抗体(美国Abcam公司)。
1.2 动物实验分组及取材SPF级雄性SD大鼠24只(8~10周龄,体重200~220 g)由江苏省人民医院实验动物房提供,实验动物许可证号:SCXK(苏)2016-0002。饲养于相对湿度50%~60%、温度22~24 ℃的环境中,光照周期12 h,自由饮水和进食。采用随机数字表法分为3组:百草枯组(n=8):腹腔注射百草枯(20 mg/kg);PQ+LBP组(n=8):腹腔注射百草枯(20 mg/kg)后灌胃给予枸杞多糖(400 mg/kg);对照组(n=8):腹腔注射等量等渗盐水。……
