杨金玲，陈大宇，黄丽华，韦江艳

广西科技大学附属妇产医院/广西科技大学附属儿童医院/广西壮族自治区柳州市妇幼保健院新生儿疾病筛查中心，广西柳州 545001

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症是由于G6PD基因缺陷导致红细胞膜的G6PD生成障碍。G6PD缺乏在某些诱因引起急性溶血性贫血，并导致高胆红素血症，新生儿期重症可发展为核黄疸，导致脑瘫[1-2]。由于G6PD基因突变与其表型之间的关系尚未完全明确、G6PD缺乏症有明显遗传多样、一些特殊病理状态下G6PD酶活性并不降低和截断值设置不合理等原因，致使男性新生儿G6PD缺乏症并未全部检出[3-4]。本研究采用高通量分子测序(NGS)技术检测男性新生儿G6PD缺乏症，探讨男性新生儿G6PD基因型与表型的相关性，并合理设置男性新生儿G6PD酶活性筛查截断值，为临床诊疗提供依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 随机收集柳州市妇幼保健院新生儿疾病筛查中心男性新生儿足跟干滤纸血片1 092例。本项目通过柳州市妇幼保健院伦理委员会批准，监护人均签署知情同意书。

1.2方法

1.2.1标本采集 出生72 h后采集男性新生儿足后跟血制成干滤纸血片，5个工作日内送检。

1.2.2仪器与试剂 G6PD酶活性分析采用丰华公司的全自动时间分辨荧光免疫分析仪及配套分析试剂盒。采用Lab Aid 824核酸提取试剂及提取仪器提取干滤纸血片中的DNA 。采用NGS技术对G6PD基因外显子2～13测序，不一致的结果采用多色探针荧光聚合酶链反应(PCR)熔解曲线法验证(厦门致善生物G6PD基因检测试剂盒) 。

1.3评估方法 G6PD酶活性<2.6 U/gHb，筛查结果为阳性。本研究检出的G6PD基因变异，查询公共数据库gnomAD、千人项目中国人群、ExAC数据库等，并通过多种计算机软件预测该变异对基因或基因产物致病结论是否一致。PCR熔解曲线结果判读按G6PD基因检测试剂盒说明书进行。WHO根据G6PD缺乏症患者酶活性等级及临床表现，将G6PD缺乏症分为5种类型：Ⅰ型酶活性最低，为0%；Ⅴ型酶活性最高，>200%；……