靳彩玲，姬颖华，王荦楠，杨军，张清琴，牛红蕊

（新乡医学院第一附属医院肿瘤科，河南新乡 453000）

肺癌是所有癌症中发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，是严重的世界公共卫生问题[1]。目前，肺癌的具体发病机制尚不完全清楚，抑制肺癌细胞恶性生长是肺癌治疗的主要研究方向。天竺葵素（pelargonidin，PEL）是天然的花青素单体，具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎等生理活性[2]。大量研究报道，不同来源的PEL 对肺癌、胃癌、肝癌等均有一定的抑制作用[3-5]。但PEL 在肺癌中的具体作用机制尚不完全清楚。本研究拟通过网络药理学分析PEL在肺癌中的潜在治疗靶点，并通过相关功能实验进行验证，旨在探讨PEL 治疗肺癌的分子机制，为其临床应用开发提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞与实验动物来源 人肺癌细胞NCIH1975、NCI-H292 购自上海中科院细胞库；16 只BALB/c裸鼠，SPF级，雄性，6周龄，体质量16～20 g，购自河南省实验动物中心，生产许可证号：SCⅩK（豫）2017-0001。

1.1.2 药品 PEL 购自美国Sigma，质量分数＞98%，取3.07 mg PEL 溶于10 mL 无菌水中，配制为100 mmol/L 母液，再梯度稀释为10、20、25、40、50、80、100μmol/L的溶液。

1.1.3 试剂与仪器 干扰KIF11（shKIF11）慢病毒载体及杂序的短发卡RNA 阴性对照（shNC）、pcDNAKIF11 质粒及其阴性对照物（Vector）由北京阅微基因技术股份有限公司提供；脂质体2000 试剂盒（美国Invitrogen）；细胞计数（CCK-8）试剂（美国GLPBIO）；Transwell 小室、基质胶（美国BD）；正常山羊血清、生物素化山羊抗兔、细胞裂解液（上海碧云天生物科技有限公司）；兔抗细胞增殖抗原Ki67、KIF11 抗体（美国Abcam）；iMARK 酶标仪（美国Bi-Rad）；CⅩ21BIM-SET5显微镜（日本OLYMPUS）。

1.2 PEL潜在靶点的预测和筛选

在PubChem 中获取PEL 的SMILES 号，并导入SwissTarget 和TargetNet 数据库，获取PEL 的预测作用靶点；下载TCGA_LUSC 数据矩阵，利用生信人工具采用t-检验统计学方法进行差异基因分析，筛选出在肺癌患者中表达上调的基因；……